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响应面法优化超声辅助提取白花蛇舌草多酚的工艺研究

2021-03-17 12:22编辑: www.jxszl.com景先生毕设
摘 要本文主要以白花蛇舌草中的多酚为研究对象,采用超声波提取法,利用有机溶剂对白花蛇舌草多酚进行提取,利用响应面分析法在单因素试验基础上选取的料液比、提取温度和乙醇浓度三个主要因素,得出白花蛇舌草多酚超声提取的最佳工艺条件为料液比是1:40,提取温度40 ℃,乙醇浓度50% 白花蛇舌草多酚的预测提取量可达5.535mg/g,与实际实验最大提取量偏差0.668%,说明该模型用于提取白花蛇舌草多酚是可靠的,可为日后进一步的开发利用提供依据。
目 录
郑 重 声 明 I
摘 要 II
Abstract III
目 录 IV
1绪 论 1
1.1 白花蛇舌草研究背景 1
1.2 白花蛇舌草的化学成分研究 2
1.3 白花蛇舌草药理作用研究 2
1.3.1 抗肿瘤作用 2
1.3.2 抗氧化作用 3
1.3.3 免疫调节作用 3
1.4 白花蛇舌草多酚提取工艺的研究 4
1.4.1 溶剂提取法 4
1.4.2 微波提取法 4
1.4.3 超声提取法 5
1.4.4 酶解提取法 5
1.5 小结 6
2研究内容 7
2.1 实验内容 7
2.1.1 试剂及药材 7
2.1.2 实验仪器与设备 7
2.2 研究方法 7
2.2.1 对照品制备及标准曲线绘制 8
2.2.2 供试品的制备 8
3 结果与分析讨论 9
3.1 超声提取过程中单因素对多酚得量的影响 9
3.1.1 料液比对多酚提取量的影响 9
3.1.2 乙醇浓度对多酚提取量的影响 10
3.1.3 提取温度对多酚提取量的影响 10
3.1.4 提取时间对多酚提取量的影响 11
3.2 采用响应面法优化白花蛇舌草多酚提取工艺 12
3.2.1 响应曲面分析因素水平的选取及实验设计 12
3.2.2 响应面数值分析结果 1 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ¥351916072¥ 
3
3.2.3 响应曲面分析与优化 15
3.3 白花蛇舌草多酚提取工艺条件的确定 19
结 论 20
参考文献 21
致 谢 23
1绪 论
1.1 白花蛇舌草研究背景
 白花蛇舌草(Hedyotidis difffusa Willd.)为茜草科耳草属一年生草本植物[1]。别名蛇舌草、蛇利草、蛇总管、鹤舌草、龙舌草等[2]。我国大部分地区均有分布,国内主要生长于广西、广东、云南、海南等地方[3],在国外主要分布在热带亚洲地区[4]。白花蛇舌草作为传统中药材常以全草供药用,性甘寒且微苦,清热解毒,消痈止痛之功效,常主治痈疮毒、咽喉肿痛、毒蛇咬伤及热淋。具有非常好的药用价值[5]。
白花蛇舌草多酚主要包含黄酮类、蒽醌类、甾醇类等成分。植物多酚广泛存在于植物体内,具有抗氧化、抗炎、抗病毒、抗癌、预防心血管疾病、减缓骨质疏松等多种生物功能。因此,植物多酚的开发研究越来越受到众多学者的重视。目前,对白花蛇舌草多酚的研究鲜见报道,因此开发白花蛇舌草多酚具有重要的意义。多酚的提取方法多种多样,研究表明超声波辅助提取多酚的方法效率会更高,且相对于其它方法溶剂和原材料的消耗使用较少,最终提取的多酚杂质少、产量也高[6]。
本文以白花蛇舌草为研究对象,利用超声波辅助提取白花蛇舌草多酚,并采用响应面进行提取工艺优化,以期为白花蛇舌草多酚的开发利用提供参考。
响应面分析法是采用多元二次回归方程作为函数来优化提取工艺过程的一种高效实用的方法,它研究因素之间、因素与响应面之间的相互关系,与传统的正交试验相比,它的实验次数较少,所需时间较短,能在合理的范围内对所选的实验参数进行全面优化,最终得出更精准的结论,可信度更高,已被广泛应用于各种生物化工过程的提取工艺优化研究中,运用响应面法优化旨在为相关研究提供理论借鉴。
1.2 白花蛇舌草的化学成分研究
白花蛇舌草的化学成分包含黄酮类、蒽醌类、挥发油类、萜类、含酸化合物、甾醇类、多酚类、生物碱、强心苷类等成分。张海娟等[7]采用常压硅胶柱层析、加压硅胶柱层析、减压硅胶柱层析、凝胶柱层析等色谱分离,从白花蛇舌草的提取和分离中得到5种类黄酮,通过光谱数据分析确定了化学结构分别为山奈酚、山奈酚3OβD吡喃葡萄糖苷、山奈酚3O(6〞D鼠李糖基)βD吡喃葡萄糖苷、槲皮素3OβD吡喃葡萄糖苷、槲皮素3O(2〞O葡萄糖基)βD吡喃葡萄糖苷。
现代药理学研究发现黄酮类化合物也是白花蛇舌草中的重要药理成分之一。从白花蛇舌草中提取的的黄酮类化合物主要是山奈酚、槲皮素及其苷类。吴孔松[8]等从白花蛇舌草中分离得到5种化合物,其中穗花杉双黄酮为首次从该植物中分离得到。甾体类化合物是一类结构中具有环戊烷骈多氢菲甾体母核的天然化学成分,其普遍的存在于自然中,理化活性主要来源于苷元部分。已从白花蛇舌草中分离出的甾体类化合物多是以甾醇及其苷的形式存在。张硕[9]从白花蛇草中得到豆甾醇[10],毛杏飞从白花蛇舌草中提取得到β谷甾醇[11]。
1.3 白花蛇舌草药理作用研究
1.3.1 抗肿瘤作用
近年来白花蛇舌草的药理学研究多体现在抗肿瘤方面。研究显示,白花蛇舌草中含有蒽醌、萜类、黄酮等多种抗肿瘤活性成分,是中医临床治疗各种肿瘤的常用药物,作用明显,且副作用小。白花蛇舌草提取物对人肝癌、肺癌、宫颈癌等多种肿瘤都有显著的疗效。焦玉红[12]对白花蛇舌草的水提取物、醇提取物、多酚提取物的抗肿瘤活性进行研究,发现醇提物和多酚提取物的抗肿瘤活性优于水提物的活性。
1.3.2 抗氧化作用
白花蛇舌草中的抗氧化活性成分主要有多酚、黄酮、羟基蒽醌等。于新[13]研究了其中六种不同溶剂萃取物的抗氧化活性,并对其有效成分进行研究,结果显示这6种溶剂的提取物均表现出不同程度的抗氧化性,丙酮提取物的抗氧化作用最强,乙醚和石油醚提取物的抗氧性最弱;同时对丙酮提取物的化学成分进行分析,发现其有效成分主要是多酚、黄酮、羟基蒽醌、有机酸;这些化合物具有改变氧化态或烯醇类型和酮类功能基团的化学特征,因此有较强的抗氧化活性。

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