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正交法优化秦艽多糖的超声提取工艺研究

2021-03-17 12:24编辑: www.jxszl.com景先生毕设
摘 要本实验以秦艽为研究对象,采用超声提取法辅助提取秦艽中的多糖成分。研究各影响因素及交互作用对秦艽多糖提取率的影响,并通过正交法优化秦艽多糖的提取工艺条件。通过对秦艽的药材背景、化学成分、多糖药理活性及国内外的研究现状进行阐述。通过单因素实验,给定因素及水平,按L9(34)正交表进行试验,通过正交试验得出结果,并用相应的方差分析法对实验结果进行分析。由此得出秦艽总多糖的最佳提取条件为料液比1:40,取时间50min,提取温度45℃,功率为390W得出的最佳得率为2.42%。
目 录
1综 述 7
1.1秦艽的概述 7
1.2秦艽的化学成分 7
1.2.1多糖类 7
1.2.2环烯醚萜类 7
1.2.3三萜和甾体类 8
1.2.4挥发油类 8
1.2.5生物碱 8
1.2.6其他成分 8
1.3多糖的药理作用 8
1.3.1抗癌提高免疫力 8
1.3.2抗凝血抗血栓作用 8
1.3.3降血脂 9
1.3.4抗病毒作用 9
1.3.5延缓衰老 9
1.4多糖的提取方法 9
1.4.1水提法 10
1.4.2酸碱提法 10
1.4.3生物酶提取法 11
1.4.4超声提取法 11
1.5国内外关于该论题的研究现状和发展趋势 11
1.6秦艽的研究目的与意义 12
2实验部分 13
2.1药材 13
2.2仪器与试剂 13
2.3原料预处理 13
2.4实验溶液的配制 13
2.4.1葡萄糖标准溶液的配制 13
2.4.2苯酚试剂的配制 14
2.4.3标准曲线的制作 14
2.4.4最大波长的选择 14
2.4.5计算含量 15
2.5单因素实验 15
2.6秦艽多糖超声辅助提取正交试验设计 15
3结果与分析 16
3.1单因素试验结果 16
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3.1.1提取温度对得率的影响 16
3.1.2提取时间对得率的影响 16
3.1.3料液比对得率的影响 17
3.1.4超声功率对得率的影响 18
3.2正交试验及结果分析 19
3.3验证实验 20
结论 21
参考文献 22
致谢 23
1综 述
1.1秦艽的概述
秦艽为龙胆科多年生草本的植物秦艽、麻黄秦艽、粗颈秦艽或小秦艽的干燥根[1] [2]。长度为0.30.6米,整个秦艽是光滑的,叶子肥,枝条上的叶子有68个,叶片为扇形,根连接在一起,夏天和秋天开花,花长在上面呈圈状。根部被叶子包住有众多的根聚结在一起成球状形的根。秦艽的枝条稀大片生长,笔直或倾斜。呈黄绿色偶尔上面显现紫色看起来呈球状。根部的叶子是半球形,长是60280毫米,宽2560毫米,上面宽或很窄,根部慢慢变窄。四周光滑,叶子为23对,在两边突出,在下方凸起,叶颈肥,长3050毫米。大多的花没有梗,簇生枝上面是头状或圈状,花萼是黄色的偶尔带有紫色,长0.70.9厘米。一端分叉像火焰状,前面是方形或者球形,萼齿23对,不多,锥形。雄蕊长在颈的下方,排列规则,呈多条丝带状,长约为0.2厘米0.3厘米。花果期在七月到十月。
秦艽在我国的中药中占有重要的地位,在各大本草专著中均有记载[3],它的疗效显著。最佳产地在西北地区陕西和甘肃,其他地方像内蒙古、宁夏、河北、新疆、东北、山西等都有分布。秦艽生长在海拔8005000米的高山草甸、山坡草地、溪边、向阳的地方及干草原等地,适应秦艽生长的环境很广泛。秦艽的药用部位是大叶秦艽、麻黄秦艽、粗秦艽和小秦艽的干燥的根[4]。它的根细长质量轻易折断,味道有点苦。地道秦艽以根宽、质量厚实、颜色微黄、没有棕皮者为优[5]。
1.2秦艽的化学成分
1.2.1多糖类
实验表明,水解产物经过化学溶剂1PHENYL3METHYL5 PYRAZOLONE COLUMN处理后进行研究。最后得出秦艽多糖由赤糖、苏力糖、果糖、核糖、脱氧核糖、多羟基醛糖等构成的,多塘有麦芽多糖等。实验证明,苦参素,苦参酚,异牡荆素,藤酸及其糖脂大叶苷C和D,也是秦艽的重要成分。
1.2.2环烯醚萜类
环烯醚萜是秦艽植物的特征性成分,从古至今从秦艽中提取获得的环烯醚萜苷有栀子苷、桃叶珊瑚和梓醇苷,裂环烯醚萜苷有尤胆苦苷、皂苷、糖醛酸苷等[6]。龙胆苦苷拥有利胆、健胃、降压等作用。通常采用取高效液相色谱进行提取[7]。
1.2.3三萜和甾体类
三萜和甾体在该植物中有很多。李占成从陕西秦艽中得到四氢叶酸12甲基28油酸和四羟基尿酸。此后李芳芳在秦艽中分离提取得到齐墩果酸、熊果酸、白桦酯酸、木栓酮等。其中的五环三萜具有抗肿瘤、抗炎、抗菌和护肝作用。
1.2.4挥发油类
秦艽药材因富含有挥发油成分,因此气味芳香,该特性用来测定该药品的含量。秦艽包括挥发成分富含醛,酚类化合物。邓瑞东等采用了大孔树脂提取秦艽中的挥发油成分,并且用高效液相色谱法研究了挥发油的成分[8]。
1.2.5生物碱
秦艽植物根中是否有生物碱是一个有争议性的话题,有些实验结果表明有,有些说没有。龙胆苦苷很不稳定,如果加了氨水就能形成尤其胆碱,尤胆二碱,如果不加NH4OH则不会生成尤胆碱和尤胆二碱等生物碱[9]。
1.2.6其他成分
秦艽不仅含有钙、镁、钾、锰等微量元素。最主要的是有正三十二碳烷,正三十四碳烷乙酸,正三醇,葡萄糖醛酸,另外有抗氧剂褪黑色素苯甲酸及其衍生物。
1.3多糖的药理作用
1.3.1抗癌提高免疫力
多糖对肿瘤细胞有直接抑制其生长繁殖和降低肿瘤扩散的能力,多糖能通过增强机体免疫力,实现对早期肿瘤的控制。研究表明,大量多糖都具有活性因子有抗癌作用。多糖能够唤醒体内的巨噬细胞,它能够将细胞或异物吞噬也可以直接杀伤或损伤癌细胞而起作用。因为巨噬细胞通过在体内作用而产生干扰素直接损伤癌细胞刺激免疫系统,也能够改变癌细胞生存的环境条件而使癌细胞法生存。
1.3.2抗凝血抗血栓作用

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