秦皮多糖提取工艺优化研究
目 录
1概述 1
1.1选题背景 1
1.2药用资源研究 1
1.3化学成分研究 2
1.3.1酚酸类成分 2
1.3.2香豆素类成分 2
1.3.4甾醇和三萜类 2
1.4药理作用研究 3
1.4.1利尿作用 3
1.4.2抗氧化作用 3
1.4.3抗病原及抗炎作用 3
1.5秦皮的临床应用 3
1.5.1治疗关节炎 3
1.5.2治疗湿热引起的眼赤烂 3
1.5.3治疗风热或肝热引起的目赤肿瘤 4
1.6多糖提取工艺研究现状 4
2实验部分 6
2.1实验仪器与试药 6
2.1.1仪器 6
2.1.2试药 6
2.2标准品溶液和供试品溶液的制备 6
2.2.1原料的预处理 6
2.2.2葡萄糖标准品溶液的配制 6
2.2.3供试品的制备 7
2.3超声辅助提取秦皮多糖工艺流程 7
2.4多糖含量测定方法的选择 7
2.4.1显色方法 7
2.4.2测定波长的建立 7
2.4.3标准曲线的绘制 7
2.5秦皮多糖提取单因素试验 9
2.5.1料液比对秦皮多糖提取率的影响 9
2.5.2超声温度对秦皮多糖提取率的影响 10
2.5.3超声时间对秦皮多糖提取率的影响 11
2.5.4超 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: @351916072@
声频率对多糖提取率的影响 11
2.5.5醇沉比对多糖提取率的影响 12
2.6响应曲面优化试验 12
2.6.1响应曲面优化试验设计及试验结果 12
2.6.2响应曲面试验方差分析结果 13
2.6.3响应曲面交互作用分析 14
2.6.4工艺验证 16
2.7小结 16
结 论 17
参考文献 18
致 谢 19
1概述
1.1选题背景
秦皮(Fraxinuschinensis Roxb.)是木犀科植物其中的白蜡树等五种植物的树干皮,还有它们的干燥枝皮[1]。秦皮主要生产在陕西省、河南省、山西省等这些地方,它的味道稍苦,性寒,有提高人体视力、清除人体热量,除去人体湿气这几种疗效;主要用于治疗湿热、腹泻,“亦有止疼痛的效果”[1]。实验表明,秦皮主要含有的化学成分有香豆素类、木脂素类等;“它可以抵抗肿瘤,祛痰,调节免疫系统,还可以降低血尿酸” [23]。秦皮分布很广,有效成分明了,更重要的是,它的价格非常便宜,而且毒负作用不大,临床应用广。而现在,对秦皮的研究主要集中在秦皮乙素、秦皮素、还有秦皮甲素这些成分上,但很少有人研究秦皮里边的多糖,而它却在人们的生活中发挥了非常重要的作用,也是人们生活中必不可少的一部分。
经查阅有关资料,和原有的研究方法比较,本论文选用超声辅助提取法提取秦皮中的多糖成分。该方法不仅提取效率高,而且还大大缩短了提取时间;“并且与水提法和醇提法相比,还有较好实验重复性、提取物结构完整、能多次利用提取成分的溶剂、成本低等特点”[46] 。本实验采用超声提取法提取其多糖,选择醇沉比、料液比、超声时间、超声温度、超声频率5因素来进行单因素试验;在此基础上,采用响应曲面这种方法,优选秦皮总多糖提取最佳工艺条件。本文主要对秦皮中多糖的提取工艺进行优化研究,为进一步高效合理地利用秦皮资源提供依据。
1.2药用资源研究
根据相关记录和资料发现秦皮品种多样,以下均为常见品种:
1.尾叶梣(Fraxinus caudata J.L.Wu):类似于花萼梣,五月开花,十月结果。陕西和河南部分地方有收购。
2.大叶梣(Fraxinus rhynchophlla Hance):幼嫩枝及叶柄无毛,叶片关节和叶背具锈色毛,叶长8~11厘米,宽4~6厘米。东北秦皮或辽宁秦皮产品销售大部分国家。
3..华山梣(Fraxinus huashanensis (WuetXie)Snu):5月开花,10月结果。陕西南部山区民间医药。
4.宿柱梣(Fraxinus stylosa Lingelsh):叶状叶在主脉上方,无叶无毛。萼状花萼宽,白色或绿色,4瓣。长勺形,长2毫米。关节和叶柄的分支明显增大,叶轴关节簇生锈毛,叶7到9,花序大,花瓣呈椭圆形。由于皮孔灰色,该商品被称为陕西白点秦皮。
1.3化学成分研究
1.3.1酚酸类成分
魏秀丽等人 “采用大量的实验方法对中药秦皮在乙醇中提取物质进行分离,通过波谱的方法和理化性质的测定鉴定它的结构,确定分离得到的化合物包括酚酸类、酚苷类、甾醇类及三萜类” [7]。
1.3.2香豆素类成分
香豆素类化合物是秦皮的主要活性成分,刘丽梅等“采用乙醇回流提取秦皮化学成分,其中分离出了的淡黄色针状结晶与秦皮中的6,7二甲氧基8羟基香豆素13CNMR,1HNMR谱相似,结构也相似,经HMBC谱的近一步验证,可以确定此化合物为6,7二甲氧基8羟基香豆素;黄色针状结晶与秦皮中的秦皮苷13CNMR,1HNMR谱相似,确定此化合物是秦皮苷;白色针状结晶的硅胶薄层色谱显示,与秦皮甲素的Rf值一致,可以确定此化合物为秦皮甲素”[8]。
1.3.3木脂素类成分
张冬梅“等应用硅胶柱层析法从白蜡树树皮里分离出了(+)pinoresinoi、(+)acetoxypinoresinol、(+)pinoresinollDglucopyranosid、(+)cycloolivil、(+)syringaresinol4,4ObisβDglucopyranoside。 (+)acetoxypinoresinol具有VEGFR1酪氨酸激酶抑制活性,表示其具有抗癌活性”[9]。
1.3.4甾醇和三萜类
魏秀丽等人“从中药秦皮的乙醇提取物中分离得到的甾醇包括β谷甾醇和胡萝卜苷,同时还得到三萜类成分熊果酸”[7]。马志静等人“从秦岭白蜡树茎皮中分离得到三萜类成分蔷薇酸和白桦酯酸” [10]。
1.4药理作用研究
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