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荧光光度法测定药品中维生素b2含量条件研究

2021-03-17 12:27编辑: www.jxszl.com景先生毕设
摘 要 本文主要以药品中维生素B2为研究对象,采用荧光光度法,利用有机溶剂对维生素B2进行测定,同时考察测定最大激发波长和最大发射波长的选择,溶液pH、冰醋酸用量、光照时间等因素,对测定效果的影响。实验结果表明测定维生素B2的含量最佳工艺条件是,激发波长EX=430 nm,发射波长EM=526 nm,选择在弱酸性~中性介质中和避光条件下进行测定,冰醋酸的用量选取2.00mL,此条件下测得药片中VB2的含量为24.46%。此方法不但具有灵敏度高、操作简便、试样量少等优点,而且方法试验工艺条件简单,更容易控制。
目 录
1 绪 论 1
1.1维生素B2 1
1.2维生素B2的作用 2
1.2.1 维生素B2对小儿的作用 2
1.2.2 维生素B2对孕妇的作用 2
1.2.3 维生素B2对一般人的作用 2
1.2.4 维生素B2的特殊作用 3
1.2.5维生素B2与其他维生素的不同 3
1.2.6维生素B2的重要作用 3
1.3 荧光分光光度法 4
1.3.1荧光光度法应用 5
1.3.2荧光光度法的优点和缺点 5
1.4国内外研究现状 6
1.5 研究的目的和意义 7
2实验部分 8
2.1仪器与试剂 8
2.2 实验原理 8
2.3实验方法 8
2.3.1 溶液的配制 8
2.3.2标准曲线的绘制 9
2.3.3样品的处理 9
2.4.测定条件的选择 9
2.4.1最大激发波长和最大发射波长的选择 9
2.4.2 溶液pH对VB2荧光强度的影响 9
2.4.3冰醋酸用量对VB2荧光强度的影响 10
2.4.4光照时间对VB2荧光强度影响 10
3结果与讨论 11
3.1最大吸收波长的确定 11
3.2标准曲线的绘制 11
3.3溶液pH对VB2荧光强度的影响 12
3.4冰醋酸的用量对VB2荧光强度的影响 13
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3.5光照时间对VB2荧光强度影响 13
3.6药片VB2含量测定片 14
结 论 16
参考文献 17
致 谢 18
1 绪 论
1.1维生素B2
人们经常把维生素B2称为核黄素,它的物理性质为橘黄色针状结晶体,无臭气味,它的具体结构如下图:

它具有水溶性的性质,乙醚等有机溶剂中发生溶解反应,其结构在pH小于等于7的溶液中比较稳定,受到光照容易发生分解反应,不怕热,在较热环境中比较稳定。在蓝光环境下它的波长范围为430~440nm,并发出绿色荧光,峰值为510nm。当溶液pH值为6~7时,有最强的荧光强度,在溶液pH达到11时,荧光即会开始消失,因此我们可以根据此原理来使用荧光光度法来测定维生素B2的含量。
生物界中有许多维生素与葡萄糖存在,比如VD2、 VC、 VB2、VB1等多种维生素,它们与葡萄糖一样在水溶液中不会发出荧光,我们通常利用一些化学反应来诱导其发出荧光,可以在碱性溶液中使用铁氰化钾等来与其发生化学反应,相似地,维生素D2需要使用二氯乙酸来与其产生化学反应才可能发出荧光,因此在测定维B2是不用考虑这些因素对其的影响干扰作用。
维生素B2在碱性环境中借助太阳光可以产生分解作用而且转化为光黄素,相较于光黄素。核黄素有着更弱的荧光,因此在使用荧光光度法测定B2荧光时应注意控制溶液的pH值,要保持在酸性并且避光的条件下来测定荧光强度。
维生素B2作为人体不可获取的营养成分之一,在人体内起着十分重要的作用,它能保证机体与结构运行正常,同时在碳水化合物、脂肪、蛋白质等代谢过程中起到了极为关键的作用,可促进人体得到更健康的发育成长,同时对皮肤毛囊粘膜以及皮脂腺也能起到保护的作用。
1.2维生素B2的作用
维生素B2的一个重要生理功能便是作为辅酶来促进人体代谢。脱氢酶的组成成分为核黄素、一分子蛋白质、核酸组成的黄素酶,在氨基酸、脂质以及糖类的代谢过程非常介导氢原子转移的重要作用。许多动物和微生物生长都必须需要它。
VB2与特定的蛋白质相结合能够生成黄酶。可以在代谢物质时传递氢原素,在营养物质的吸收过程中必不可少的。在现在的社会人群中维生素B2的缺乏情况已经很普遍,尤其是小儿和孕妇比较严重,因此,维生素B2在人体内所起的作用十分重要。
1.2.1 维生素B2对小儿的作用
小孩有着较快的生产发育进程与新陈代谢,稍不注意,小孩便会缺乏维生素B2,而且小孩的生长发育、毛发以及皮肤的生长都离不开维生素B2的促进作用。
1.2.2 维生素B2对孕妇的作用
维生素B2的另外一个重要功能即是促进胎儿细胞再生与发育生长,处于哺乳期与妊娠期的妇女应该及时注意添加补充维生素B2,通常而言,哺乳期的妇女在头六个月应该补充至少1.6mg的维生素,而后六个月则需要1.8mg的维生素量,再者在以后六个月便需要补充1.7mg的维生素量。
1.2.3 维生素B2对一般人的作用
(1)使细胞再生并且可以促进发育。
(2)身体的毛发、指甲、皮肤需要维生素B2才能正常的生长。
(3)能够有效防止口腔生殖综合征的出现。
(4)能够使眼睛的疲劳得到有效缓解。
(5)如果将其和另外物质结合在一块,便能够使生物能量代谢过程以及氧化受到影响。
1.2.4 维生素B2的特殊作用
维生素B2可以改善心脏中的血液需求,并且对心绞痛患有冠心病和心肌缺血的人有很大的作用,需要每天服用3次维生素B2每次服用75毫克,在一个月的服用情况下就可以让心绞痛的发作率大大得降低,甚至可以消失。
根据相关研究人员的研究表明,维生素B2可以有效治疗偏头痛。在维生素B2的服用剂量偏高使便可以使头痛的发作频率缩短。次数减少。究其原因,因为脑细胞较少其储备的能量从而产生偏头痛。因此,维生素B2在对激发脑细胞中线粒体潜能大小时起到了重要作用。当每天服用一次400mg的维B2时便可以使偏头痛得到十分有效的治疗。
维生素B2与人们的性生活质量极为相关,当人体内维生素B2缺乏到一定程度时便会出现腔道内粘膜病变的情形,所以会出现性冷淡,性欲降低的现象。因此,当人体内缺乏维B2时便会使人体腔道黏膜受到严重损失,从而使粘膜层损坏,粘膜厚度变薄并且会使微血管出现破裂。这种损伤对于女性身体是最为严重的。阴道内的干涩、充血、破溃,便可引起性欲减少、性冷淡和性交不配合的原因都是女性缺少维生素B2所导致的。每天口服3次维生素B2 ,一次7毫克可缓解以上女性问题。

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