摘 要目的研究郁金提取物对小鼠肝癌血管生成的影响，并初步探讨其可能机制。方法采用渗漉法提取郁金中的姜黄素，建立BALB/c裸鼠模型，给予不同浓度郁金提取物姜黄素（10mg/kg、20mg/kg、30mg/kg），给药14天后处死小鼠，摘取小鼠体内肿瘤测其重量和体积，Western Blot法检测小鼠肝脏组织VEGF蛋白的表达，ELISA法检测血清中VEGF的蛋白含量。结果与对照组相比，姜黄素为10mg/kg能显著抑制小鼠肿瘤体积与重量，20mg/kg及30mg/kg时能极显著抑制肿瘤体积与重量。与对照组相比，姜黄素能下调肝脏组织中VEGF蛋白的表达。与对照组相比，姜黄素10mg/kg到30mg/kg极显著抑制血清中VEGF含量。结论郁金提取物姜黄素对肝癌肿瘤有明显的抑制作用，这一作用可能是通过与肿瘤血管生成相关的VEGF所介导的。
目 录
1概述 1
1.1郁金中化学成分的研究 1
1.1.1姜黄素类 1
1.1.2倍半萜类 1
1.1.3生物碱 2
1.1.4多糖 2
1.2郁金提取物药理作用研究 2
1.2.1抗肿瘤作用 2
1.2.2对心血管系统作用 3
1.2.3抗炎作用 3
1.2.4抗氧化作用 3
1.3郁金提取物抑制肝癌血管生成的研究概况 4
1.3.1郁金对肝癌血管生成的影响 4
1.3.2VEGF对肝癌血管生成的研究 5
1.3.3郁金提取物通过VEGF对肝癌血管生产的研究 5
2实验 7
2.1仪器与试剂 7
2.1.1实验动物 7
2.2渗漉法提取姜黄素 7
2.3小鼠肿瘤模型的建立和筛选 7
2.4给药 8
2.5测各项指标 8
2.5.1肿瘤重量与体积的测定 8
2.5.2Western Blot法检测小鼠肝癌组织中的VEGF蛋白表达 8
2.5ELISA法检测血清中VEGF含量 8
2.6数据处理 9
3 实验结果 10
3.1姜黄素对小 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
鼠肝癌的抑瘤作用 10
3.2姜黄素对小鼠肝脏组织中VEGF蛋白水平表达的影响 10
3.3 姜黄素对小鼠血清中VEGF表达的影响 11
4讨论 12
结 论 13
参考文献 14
致谢 16
1概述
郁金，为姜科植物，具有干燥的块根属于寒性药物，味道辛中带苦，最后到达心肝胆。郁金主要可以预防化学性和放射性的实验动物多种肿瘤的形成、具有活血行气镇痛、消心解郁、以及可以抑制多种肿瘤细胞的生长、减少肿瘤的数目、缩小肿瘤的体积。据研究表明榄香烯和姜黄素是郁金主要有效成分，近来研究姜黄素提取物在临床上被广泛用于肝癌等恶性肿瘤的治疗[1]。随着近年来研究的深入，已经逐渐证实了郁金有效成分姜黄素在抗肿瘤方面有较强的活性。目前已经证实肿瘤患者体内存有多种血管生成因子，其中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是最强的一种。本论文通过建立BALB/c小鼠肝癌动物模型，利用模型来观察药物通过VEGF对血管的影响，进一步判断对肝癌的影响。郁金通过下调VEGF的表达，抑制肝癌血管生成的这一课题需要我们进一步研究。
1.1郁金中化学成分的研究
现代研究表明，郁金中含有多种生物活性物质：包括姜黄素类、倍半萜类、生物碱以及多糖等多种物质。这些活性物质的药理作用被广泛应用。
1.1.1姜黄素类
郁金主要有效成分是姜黄素，姜黄素是中药郁金中的重要成分，其主要指二苯基庚烃类化合物，也包含个别戊烃类化合物，根据苯环上是否有羟基可分为酚性和非酚性两类，现在己经分离并鉴定大约20个姜黄素类化合物，其中以姜黄素，去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素为例，它们是由10个以上的单糖的糖苷键连接组成高分子碳水化合物。因为多糖具有抗衰老、抗肿瘤、调节免疫等功效，所以被广泛地用于医疗和保健行业。
1.1.2倍半萜类
根据结构骨架可以将倍半萜类分为很多种类，每个种类的结构都不相同。比如蛇麻烷、愈创木烷型、蒈烷类、桉烷、没药烷、榄香烯、安体舒通、吉马烷、跳马拉松烷基等多种结构。大量实验数据表明倍半萜类是郁金到现在为止的最主要活性成分，并且其种类还在不断地增加扩展，到目前为止至少有30种不同结构组成的倍半萜类化合物出现。
1.1.3生物碱
张安将等发现温郁金中含有多种生物碱并检测到其它两种结构未定的吡嗪类生物碱。说明温郁金中不仅含有微量的四甲基吡嗪，还有吡嗪类生物碱。
1.1.4多糖
从姜黄素提取的高分子组分中分离得A，B，C3种多糖的热水。A由L鼠李糖、L阿拉伯糖、D木糖、D半乳糖、D葡萄糖、D半乳糖构成；B由L阿拉伯糖、D木糖、D半乳糖、D葡萄糖、D半乳糖构成；C由鼠李糖、阿拉伯糖、D木糖、D半乳糖、D葡萄糖、D半乳糖构成，其高活性部分为6分支葡聚糖，各占比例较大。近年来温郁金的脂多糖及其生物活性受到了广泛关注。
1.2郁金提取物药理作用研究
1.2.1抗肿瘤作用
郁金的抗肿瘤作用主要依赖于有效成分姜黄素，发现姜黄素对肝癌有一定的预防和治疗效果，并且这一方面的报道相对比较多。徐磊等[2]，发现姜黄素可以下调VEGF与受体的结合，降低肿瘤的发病机率的同时还可以帮助促进胃肠道生长素的分泌，间接的抑制能胃癌细胞生长因子的释放，导致VEGF表达减少。在实验完成后，观察小鼠各项活动指标均正常，这说明姜黄素在治疗肿瘤方面的副作用还是相对小的。查阅资料发现郁金无论是对体外肿瘤细胞、荷瘤动物还是在临床上都是一种非常有潜力的抗肿瘤药物，以下是对郁金抗肿瘤机制在各方面的研究。
郁金在体外抗肿瘤方面可以诱导肿瘤细胞坏死，对多种体外恶性肿瘤细胞都有显著的抑制作用。用郁金提取物姜黄素作用于人肝癌细胞时郁金醇提物在体外能直接抑制肝癌细胞增殖并诱导其凋亡，可以明显看到大量肿瘤细胞持续凋亡坏死并有一个最高凋亡值，并且使提取物姜黄素对肝癌细胞具有毒作用，因此姜黄素可以作为一种光敏剂通过放疗和化疗的方法使肝癌细胞凋亡坏死，达到抗肿瘤的目的[3]。
研显示郁金提取物不仅在体外有抗肿瘤作用在对荷瘤动物也具有显著的抗肿瘤作用。经研究发现能使肿瘤体积明显减少达到治疗目的的一种药物成分就是从郁金中提取出来的β榄香烯。说明郁金提取物可以诱导肿瘤细胞凋亡，增强机体免疫功能，并且其抑制肿瘤生长的作用有一定的药物浓度依赖性。从郁金提取的姜黄素制剂在我国抗癌的临床实验中有深远的研究意义，受到医疗学者的重视。周定[4]用榄香烯加依托泊苷联合用药治疗晚期非小细胞肺癌，发现联合用药使其抑瘤率高达70%，效果远远高于单用依托泊苷的治疗效果。说明郁金不但自身有抑瘤作用，在与其他抑瘤药物合用是还可以增强药物的疗效。官成浓等[5]报道，有很多因为没有及时治疗的胃癌已经晚期的患者面临这生命危险，确定一种有效治疗胃癌的药物迫在眉睫。发现在使用了郁金提取物榄香烯榄香烯可以使患者机体内的白细胞淋巴细胞和红细胞的数量及免疫功能均明显增加，说明榄香烯可以通过化疗药物联合治疗中晚期胃癌，抑制了胃癌血管的生成以及可以保护机体的免疫功能。说明榄香烯在临床上作用于肿瘤细胞并发挥抗肿瘤作用应用是非常广泛的。

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