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高效液相色谱法测定金果榄中古伦宾含量

2021-03-17 12:29编辑: www.jxszl.com景先生毕设
摘 要目的:建立HPLC色谱法测定金果榄药材中古伦宾的含量,将古伦宾含量作为测定指标,分析来自陕西安康不同加工方法、不同规格的金果榄药材对古伦宾含量的影响。方法采用HPLC色谱法,色谱柱C18柱( 4.6毫米×250毫米,5 微米)为固定相,以CH3CN-H2O(40:60)为流动相,检测波长在210纳米处,流速为1.0 毫升每分钟,柱温为30℃,进样量是20微升。结果通过高效液相色谱法测出,不同加工方法、不同规格的金果榄药材中古伦宾含量差异不显著(P>0.05),因此不同加工方法和不同规格的金果榄药材对古伦宾含量影响不大。结论:金果榄药材中伦宾含量与不同加工方式、不同规格关系不大,加工方法与药材规格不影响古伦宾含量测定。
目 录
1 绪论 1
1.1概述 1
1.1.1 药材性状 2
1.1.2药材鉴别 2
1.2化学成分介绍 3
1.3 药理作用研究 3
1.3.1抗炎镇痛作用 3
1.3.2抑菌作用 4
1.3.3治疗咽喉肿痛 4
1.4国内外研究现状 4
1.4.1本草考证 4
1.4.2 生药学研究 5
1.4.3 品质研究 5
1.4.4 临床应用与展望 6
1.5选题的目的及意义 6
2 实验方法 7
2.1 实验仪器 7
2.2实验试药 7
2.3 色谱条件 7
2.4 溶液制备 7
2.4.1 样品溶液的制备 7
2.5 不同加工方法对金果榄药材中古伦宾含量的影响 8
2.6 不同规格对金果榄药材中古伦宾含量的影响 8
2.7 线性关系考察 8
2.8 精密度试验 9
2.9 重复性试验 9
2.10 稳定性试验 9
2.11加样回收率试验 10
2.12样品含量测定 10
2.12.1含量测定 10
2.12.2标准曲线绘制及含量计算 10
3 结果与讨论 14
3.1 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: &351916072
结果 14
3.1.1不同加工方法对金果榄药材中古伦宾含量的影响 14
3.1.2 不同规格金果榄药材对古伦宾含量的影响 14
3.2讨论 14
参考文献 16
致谢 18
1 绪论
1.1概述
根据2015版《中国药典》描述金果榄是防己科植物青牛胆或者金果榄的干燥块根。心叶青牛胆是它的同属植物。味苦,属寒性药材,归肺、大肠经。金果榄药材有多方面的药用价值:清热解毒、抗炎镇痛、利咽止痛、降血糖等功效,被称为可代替抗生素的首选药物[1],因此受到人们的一致认可。内服主要用于治疗各种炎症,外用治疗静脉炎、毒蛇咬伤[2]等症状。是民间常用草药,并且已经流传多年,每版《中国药典》均有收载,该药材具有较独特的地区特点。
金果榄主要生产于贵州、四川、湖南、湖北、广西、江西、陕西[3]等地区。其中主要含古伦宾、金果榄苷、盐酸巴马汀、青牛胆苦素、盐酸药根碱、咖伦宾、非洲防己碱、蝙蝠葛碱、千金藤碱和木兰花碱等活性化学成分[4]。因为它的产地分布较为广阔,来自不同产区之间药材品质会有所不同,容易对它们的临床应用和相关药物制剂制备时质量稳定性产生较大影响,为了全面、有效地控制金果榄药材的质量,本文以其中一种主要活性化学成分古伦宾为研究对象,采用HPLC对其含量进行测定,比较不同加工方法、不同规格金果榄药材中古伦宾的含量,以此评价金果榄药材的质量。
古往今来,金果榄几乎靠采挖野生资源,因为最近几年用药量急剧增加,并且它的生长周期很长,自己繁育能力较低,野生资源现已面临濒危的险境,人工栽培或者抚育将逐步代替野生资源,成为以后药材来源的主要途径。目前,已有获得金果榄野生引种成功的报道,为了确保人工抚育药材的质量,对金果榄活性化学成分的研究显得越来越重要。本文主要探寻最佳加工方法和最宜规格,促进金果的开发和利用,为临床医学安全使用、制剂制备选材等提供理论依据。
本试验研究方法准确、可靠、简单,并且重现性良好,对金果榄药材的质量评价更加推进一步。
1.1.1 药材性状
金果榄常常多个相连,外观是不规则的圆块状,长约为5至10厘米不等,直径3至6 厘米左右。表面颜色为棕黄色或者淡褐色,粗糙有槽纹,质地坚如磐石,故很难将其击碎和切开,切开后断面为淡黄白色,导管束呈放射状排列 [1]。
1.1.2 药材鉴别
粉碎后的金果榄粉末呈黄白色或灰白色。有众多石细胞,直径在18至66微米之间。胞腔里面含有草酸钙方晶,该方晶直径大约有4至28微米。木栓细胞颜色为黄棕色或者金黄色,表面看起来是多角形,微木化,有球状、盔帽状或者多角状圆形的淀粉粒,而且淀粉粒还很多,它的直径在4到4微米之内,脐点像人字形、短弧状或者点状,复粒大约由2个至5个分粒组成[1]。
取该药材粉末约1克,精密称定,称量后倒入50毫升锥形瓶中,加入20毫升CH3OH使其溶解,超声处理30分钟,待超声清洗仪停止运行后取出锥形瓶将溶液放凉,摇匀溶液后过滤,取续滤液使用蒸发皿蒸干,余下的残渣再加2毫升CH3OH使溶解,将其作为供试品溶液备用。另取适量古伦宾对照品,同样加入70% CH3OH,制成每1毫升含0.5毫克对照品溶液。按照TLC试验,分别吸取以上两种已制备好的溶液2到3微升,将其点在同一硅胶G薄层板上,展开剂为C6H12CH3COOC2H5CH3OH浓氨试液(10:9:6:1)的上层溶液,展开,取出后使晾干,然后喷洒百分之十硫酸乙醇溶液,在105摄氏度条件下加热,直到斑点显示清晰的颜色后置于日光灯及365纳米紫外光灯下检视。检测结果为对照品色谱与供试品色谱在相应位置上,呈现同一种颜色的斑点或荧光斑点。
1.2 化学成分介绍
金果榄中主要含有萜类、生物碱类、甾醇类三大类化学成分,古伦宾是萜类活性化学成分之一,具有很明显的抗炎镇痛作用[5],此临床作用主要被人们应用在各种炎症上,如:急慢性咽炎、药物性静脉炎、外感发热等。
生物碱类化学成分有:千金藤碱、蝙蝠葛碱、防己碱、药根碱、异非洲防己碱、非洲防己碱、木兰花碱等,主要为季铵生物碱。
萜类化学成分有:青牛胆苦素、非洲防己苦素、金果榄苷。
甾醇类化学成分有:2去氧甲壳甾酮、2去氧3表甲壳甾酮、2去氧甲壳壳甾酮30β吡喃葡萄糖甙。
1.3 药理作用研究
1.3.1抗炎镇痛作用
根据研究报道金果榄中活性物质基础为上述三类化学成分,主要起到抗炎、镇痛作用。钟鸣[6]等报道,金果榄C2H5OH提取物对小鼠C6H4(CH3)2引起的耳朵浮肿、鸡蛋清引起大鼠脚趾浮肿和棉球肉芽增生有显著抑制作用,该报道表明金果榄提取物有显著抗炎作用。殷崎[7]等研究报道,地苦胆胶囊能够阻抑小鼠肉芽增生,对角叉菜胶和C6H4(CH3)2引起的炎症性浮肿有显著的阻抑效果。劳梅丽[8]等报道表示,来源于海南的青牛胆可以显著消除大鼠关节浮肿, 降低疼痛感,同时减少炎症反应。该研究显示金果榄抗炎作用显著、虽然镇痛作用没有抗炎作用明显,但在一定程度上也能起到镇痛效果。

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