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苦瓜提取物含量测定方法研究

2021-03-22 17:15编辑: www.jxszl.com景先生毕设
摘 要本实验对苦瓜皂苷的含量测定方法进行了研究。苦瓜皂苷是苦瓜提取物中最主要的生理活性成分之一,对降血糖、增强免疫力和抑制肿瘤细胞生长具有显著的治疗作用。通过强氧化性酸使苦瓜皂苷在脱氢的条件下,能与香草醛形成红色溶液,用紫外分光光度法测其吸光度,计算皂苷类物质的含量。因此本实验通过紫外分光光度法(UV)对苦瓜提取物进行含量测定,从而建立一种准确、快速、简便的测定方法,保证了苦瓜提取物中皂苷含量测定的可行性。实验方法以苦瓜皂苷为对照品,香草醛-冰醋酸-高氯酸作为测定苦瓜皂苷的显色条件,用紫外扫描测其吸光度进行含量测定;测定苦瓜皂苷的条件选0.8mL高氯酸,0.2mL5%香草醛−冰醋酸溶液,60℃热水中反应15min;实验结论苦瓜皂苷标准曲线为Y=0.0025X-0.0054,R²=0.9993,精密度和稳定性可靠,回收率为100.78%。
目 录
1 文献综述 1
1.1 苦瓜的概况 1
1.1.1 苦瓜的简介
1.1.2苦瓜的价值
1.2 苦瓜的主要活性成分 2
1.2.1苦瓜皂苷
1.2.2苦瓜多糖
1.2.3苦瓜蛋白
1.2.4其他成分
1.3 苦瓜的药理作用 3
1.3.1降血糖
1.3.2抗肿瘤
1.3.3抗病毒
1.3.4抑菌抗炎
1.3.5抗衰老抗氧化
1.3.6抗生育作用
1.3.7其他作用
1.4含量测定方法 5
1.4.1 高效液相色谱法(HPLC)
1.4.2 薄层色谱法(TLCS)
1.4.3分光光度法(UV)
1.4.4其他方法
2 实验内容 7
2.1实验设备及材料 7
2.1.1试验材料
2.1.2实验设备
2.2实验方法 8
2.2.1试液的制备
2.2.2实验操作
2.2.3有效成分最大吸收波长的测定
2.2.4方法学考察
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2.2.5供试品含量测定
2.3 实验结果及分析 10
2.3.1苦瓜苷A对照品光谱扫描结果
2.3.2线性关系考察
2.3.3精密度实验
2.3.4稳定性试验
2.3.5重复性试验
2.3.6回收率
2.3.7供试品含量测定
结果与讨论 16
参考文献 17
致 谢 20
1 文献综述
1.1 苦瓜的概况
1.1.1 苦瓜的简介
苦瓜又叫做锦荔枝,是在我国古代时期,从南亚地区被传入,通过几百年的发展,现在的种植范围已经扩大到了温带及热带地区。苦瓜的味道尝起来较苦,属于寒性蔬菜,在现代家庭中常作为食品出现,不仅具有食用价值同时又因其所含有的物质苦瓜皂苷而具有较多的药用价值,经常食用苦瓜能够促进饮食并且消炎去热,清心明目。苦瓜提取物中的活性物质有多种药理功能,如降血糖、抑菌、抗肿瘤、抗氧化等,所以引起了许多学者广泛的研究与关注[1]。
在自然界中,苦瓜属于葫芦科的苦瓜种,能够依靠周围的物体攀岩式生长,植株上的枝杈较多切都分布着一些绒毛。植株叶片的叶柄较长且细,叶片的脉络与人手掌的纹路相似。苦瓜雄花的枝干较细;资方类似于纺锤,果实呈现出圆柱或纺锤形状,表面不平整沟壑较多,成熟的苦瓜呈橙黄色;两边有刻纹,每年的5~10月份会结果[2]。
1.1.2苦瓜的价值
在我国的中医药学领域内,苦瓜属于寒性食物,味道比较苦,能够促进饮食并且消炎去热,清心明目,预防并辅助治疗癌症,能够入心、肺、胃可以消暑解渴,同时苦瓜也有利于人体的泌尿系统。
经过试验验证得出,在苦瓜中含有人体维持生理活性的氨基酸多达八种,多占整个氨基酸的三分之一以上。无论是在蔬菜中还是水果中,其所含有的维生素C的含量最高,不仅能保护细胞膜,还能够有效地预防坏血病,防止动脉粥样硬化,进而增强身体的机体应激能力,同时还具有保护人体心脏的重要作用[3]。在苦瓜中,含有较多的皂苷以及黄酮类物质,这些物质能够有效地稳定人体的血糖水平,预防糖尿病。对于苦瓜,如果利用不同的途径进行提取,所得到的提取物则会呈现出不同药效功能。如乙醇提取物可以提高人体免疫力,具有抗氧化。而水提取物能抑制病菌,预防食物中毒;苦瓜提取物还能抑制HVI活性,从而开发治疗艾滋病的良药;从苦瓜种子中提取的α、β苦瓜素具有抗癌作用,可抑制胃癌细胞[4]。
成熟的苦瓜果实呈现出橘色,苦瓜肉味道鲜美,不仅可以当作水果品尝还能够作为菜品食用。首先将选好的苦瓜用清水洗干净,清理干净苦瓜子并处理成丝状。准备开水将切好的苦瓜烫一遍,再将苦瓜用凉水冲洗一次,加适量的佐料即可直接食用。这样的操作不仅能够保留住苦瓜内的营养物质,还能够对人的肝脏部位起到清理的功效,因此非常适合黄油高血压等疾病的人吃。除了做成凉菜,苦瓜也可以用来制作茶。先将洗干净的苦瓜的一端用刀切开口,把内部的子全部清理干净,然后在苦瓜中倒入绿茶,最后将整个苦瓜悬挂起来,注意要避免阳光直照、避免潮湿,适当通风。阴干后,把苦瓜和茶叶一起切碎并搅拌均匀,每次去适量泡水服用,能够预防并治疗中暑等症状并且有利于泌尿系统。
在苦瓜中所含有的高能清脂素是众多美容减肥类产品得有效成分,它可以被小肠吸收,不进入人体血液循环系统,从而被开发成养颜保健品。它可以改变了肠道吸收细胞的孔隙,阻碍脂肪和多糖等高热量物质的吸收,还具有减肥作用[5]。
1.2 苦瓜的主要活性成分
1.2.1苦瓜皂苷
在苦瓜中,最主要的活性物质就是苦瓜皂苷,多见于苦瓜的果实内,然而在苦瓜的茎叶部分分布较少。从目前的技术水平来看,已从苦瓜中分离到许多皂苷,Murakami T.从鲜苦瓜中分离得到三萜皂苷goysaponin I、II和III,主要是三萜类化合物[6]。经大量的实验测验以及研究发现[7],苦瓜中所大量含有的苦瓜皂苷能够有效提高巨噬细胞对肿瘤坏死因子的释放作用,并且能够大幅提升巨噬细胞对肝蛋白以及对谷胱甘肽过氧化物酶的氧化作用。
1.2.2苦瓜多糖
多糖是一种大多数分子量都大于8000,由几十个糖分子组成,具有特殊疗效的生物活性物质。且广泛存在于许多中药材中,是中药材重要的物质基础之一。苦瓜中含有大量的苦瓜多糖,是一种十分复杂的复合杂多糖,其主要组合物有鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等[8]。
1.2.3苦瓜蛋白
苦瓜中含有较多的苦瓜蛋白,它有着极为广泛的药用价值,其主要组成的成分有蛋白酶抑制剂、RNase等。在众多成分中,有一种十分难得的预防癌症的物质——核糖体失活蛋白,其相对分子质量极大,在抑制肿瘤细胞生长及增殖的方面展现出较强的优势。同时,Minami Y[9]可以从苦瓜的核糖体失活蛋白又能够分解为核糖体失活蛋白A和B两个种类,并得到一种碱性的蛋白,他能够有效地组织癌细胞上蛋白质的合成,从而达到阻止癌细胞增长的效果,并且对人体内的免疫细胞合成与增长起到一定的促进作用,以此达到预防治疗HIV的作用。

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