野西瓜总黄酮的含量测定及抗氧化(附件)
目 录
1 引言 1
1.1 野西瓜的化学成分 1
1.2 野西瓜的药理作用 2
1.3 野西瓜含量分析 3
1.4 野西瓜黄酮类成分的抗氧化活性检测 3
1.5 研究意义及内容 4
2 实验仪器、设备和试剂 5
2.1 实验仪器 5
2.2 实验设备 5
2.3 实验试剂 5
2.4 供试样品 6
3 总黄酮含量测定方法研究 6
3.1 方法学考察 6
3.2 提取物的制备 8
3.3 样品总黄酮含量的测定 8
4 野西瓜抗氧化活性研究 8
4.1 实验试剂 8
4.2 方法学考察 9
4.3 总酚含量的测定 11
4.4 对DPPH自由基清除作用的检测方法研究 11
4.5 对O2自由基清除作用的检测方法研究 11
5 实验结果与分析 12
5.1 总黄酮含量的测定结果 12
5.2 抗氧化活性研究结果 13
结 论 16
致 谢 17
参 考 文 献 18
1 引言
野西瓜(Capparis spinosa L.)又称小秋葵、马槟榔、打瓜花等,为 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072^
山柑科藤本类植物,在我国新疆、宁夏、安徽等多个省市和丘陵地带均有踪迹,是一种多毛一年生的野生植物。野西瓜的果、叶和根皮都可以入药,味涩、性温。野西瓜中含有多种化学成份,如黄酮类、生物碱类、脂质、挥发油类、糖和苷等[1]。近些年对野西瓜的研究表明其具有降糖降脂、抗氧化作用、治疗痛风、保肝抗炎等多种药理作用[2]。因此,对野西瓜药效物质含量及抗氧化活性进行初步研究,为后续开发奠定基础。
1.1 野西瓜的化学成分
1.1.1 糖和脂肪类
野西瓜的果和根部含有较多糖类,季宇彬[3]等提炼了野西瓜果实中的多糖,并检测多糖含量及分析其中的糖成分,应用SEVAG蛋白法除去卵蛋白、褪色渗析后的野西瓜纯多糖含量为67%,而粗多糖含量为34%。野西瓜主要多糖组分为Man(甘露糖)、Glu(葡萄糖)和Gal(半乳糖)。野西瓜的根部含有HC(半纤维素)、PS(多糖)和PC(果胶)等糖类成份。
野西瓜果实中含大量脂肪,在各类脂肪酸中,油酸占30.12%、亚油酸占29.33%、棕榈酸占9.79%、亚麻酸占0.88%、四烯酸占0.67%、二十四酸占0.09%、二十碳烯酸占0.32%、顺式十八碳烯酸占20.5%、硬脂酸占2.92%。中性脂肪占总脂肪的53.2%、甘油酯占37.3%、磷酸酯占9.5%。
1.1.2 黄酮类和酚酸
植物中最常见的次级代谢产物是类黄酮、鞣酸和酚酸等化合物,而类黄酮主要位于野西瓜的花、果实和叶的细胞液泡中,它们主要根据黄素环的饱和度和羟基化程度可分为黄酮醇、黄酮和花青素。野西瓜中含有丰富的类黄酮化合物,如槲皮素、山奈酚、异银杏黄酮、银杏黄酮、芦丁和樱花素。其中野西瓜中槲皮素(180mg/100g)和芦丁(160mg/100g)含量较高,这两种类黄酮化合物均显示出多种生物活性,如抗菌、抗癌和止痛等性质。
野西瓜叶的乙酸乙酯提取物中含有较高含量的酚类化合物和类黄酮,随后是根的氯仿提取物。叶的水提取物含有154 μg/mg酚类化合物、98.33 μg/mg类黄酮和148.33 μg/mg黄酮醇。正己烷提取物含有357 μg/mg酚类化合物、812.33 μg/mg类黄酮、868.33 μg/mg黄酮醇。丙酮提取物含有49.83 μg/mg酚类化合物、106.33 μg/mg黄酮类化合物和341 μg/mg黄酮醇[4]。而就单酚酸的构成而言,在野西瓜果实中检测出了肉桂酸、原儿茶酸和香草酸,并从甲醇提取物中分离得出对甲氧基苯甲酸,这种酚类化合物对扑热息痛、硫代乙酰胺和半乳糖胺诱导的肝毒性效应起到积极作用。
1.1.3 其他物质(挥发油、萜烯、醛和酯等)
野西瓜芽油的主要挥发性化合物是苄醇(21.4%)、糠醛(9.5%)、愈创木酚(5.2%)、百里酚(5.1%)、辛酸(4.8%)和异硫氰酸甲酯(4.5%)。而在野西瓜叶芽中的主要为异硫氰酸甲酯(20.1%)、百里酚(16.5%)、愈创木酚(4.3%)、乙酸己酯(3.6%)和反式茶碱(2.6%)。
野西瓜的果实、叶、芽和花中包含正三十烷和正二十五烷,花芽还含有槲皮素样化合物(鼠李糖)、二十九烷、糖苷和三十烷醇。刺山柑果实还含有β胡萝卜素(210 mg/kg)。除此之外,果实也含有抗坏血酸(1190 mg/kg)、植酸(680 mg/kg)和草酸(1 mg/kg)。甚至野西瓜果皮和残渣含有β胡萝卜素。从野西瓜籽油中,已鉴定出约145种化学物质。在这些物质中有醛、酯、含硫化合物(分别为22%、21%和8.42%)、十种单萜、癸酸和新鉴定的倍半萜。还发现野西瓜叶油中含24.436.4%百里酚、13.2% 2己烯酮、10.2% 2己烯醇和6.3%异硫氰酸丁酯。
1.2 野西瓜的药理作用
1.2.1 抗氧化作用
殷丽娜[5]等通过对野西瓜花芽抗氧化活性研究,得出其花芽抗氧化能力较强,均有较强清除DPPH、SOD自由基能力。此外,野西瓜有螯合作用,并具有明显的抗氧化作用。Catania[6]等使用野西瓜芽的甲醇提取物,进行了抗坏血酸和大鼠脂质过氧化实验,结果发现野西瓜的抗氧化作用较强。并且当坏血酸盐去除后,野西瓜仍具有抗氧化能力,说明其抗氧化活性与坏血酸盐无关。
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