瓜蒌多糖提取工艺条件的优化研究(附件)
目 录
1 引言 1
2 文献综述 1
2.1 化学成分 1
2.2 药理作用 2
2.3 瓜蒌的研究意义 2
3 仪器与材料 4
3.1 实验材料 4
3.2 实验设备 4
4 实验方法 5
4.1 样品预处理 5
4.2 提取方法 5
4.3 单因素实验 6
5 结果与讨论 6
5.1 单因素实验结果 7
5.2 响应面实验与结果 11
5.3 验证实验 17
结论 18
致谢 19
参考文献 20
1 引言
瓜蒌为葫芦科植物栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim) 或双边栝楼(Trichosanthes rosthornii Harms) 的干燥成熟果实[1],广泛分布于我国北部。其水煎液同样具有治疗动脉粥样硬化[2]、保护损伤细胞[3]、治疗心绞痛等作用[4]。近几年对瓜蒌的提取研究主要集中在三萜皂苷、甾类、有机酸及其盐类、糖类及色素等化学成分,然而糖类成分才是瓜蒌品质评价的重要指标。由于多糖类化合物无细胞毒性,具 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: *351916072*
有高效率低毒性特点,且具有抗病毒、抗肿瘤、降血糖、降血脂等功效,所以多糖成为近几年的研究热点[5]。
目前对瓜蒌多糖的提取优化的报道尚少,超声波辅助提取多糖可以明显增强提取率,减少提取时间,增强工作效率,节省溶剂的使用。此外,超声波辅助的加热作用更有利于瓜蒌多糖的浸出[68]。本文对瓜蒌多糖的提取进行优化,得到最佳提取工艺条件,增加瓜蒌的利用率。以期望为瓜蒌的工业生产提供理论支持。
2 文献综述
2.1 化学成分
2.1.1 油脂类
瓜蒌子中富含油脂,其中瓜蒌酸是主要的活性成分。瓜蒌子中脂肪酸含量约为26%~30%,主要的不饱和脂肪酸有亚麻酸、亚油酸、油酸等[1]。
2.1.2 多糖类
瓜蒌中也含有多糖,用水提醇沉法从瓜蒌中提取多糖,经分析该多糖由三种单糖组成,分别为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖,其摩尔比为1.0: 2.4: 4.7,含量分别为鼠李糖12.1 %、阿拉伯糖26.3 %、葡萄糖61.6 %[7]。
2.1.3 甾醇类
瓜蒌子中羟基化甾醇类化合物种类较多。其中,瓜蒌仁二醇是主要活性成分,具有抗炎和抗肿瘤活性,且α菠菜甾醇的研究报道较多[9]。
2.1.4 黄酮及其苷类
瓜蒌含有10多种黄酮及其苷类化合物[7],以山奈酚类和木犀草素类为主,经研究,瓜蒌子中黄酮含量较低,报道的黄酮类成分也较少,还有待进一步研究。
2.1.5 其他
瓜蒌中还含有大量的蛋白质及氨基酸等。
2.2 药理作用
2.2.1 对心血管系统作用
近年研究表明,瓜蒌具有扩张微血管[6],改善冠脉血流量、增强耐缺氧能力、改善缺血心肌和氧的供需平衡及减少血清胆固醇等多种活性的作用。瓜蒌亦有抗凝血的作用,其中腺苷的活性最强。
2.2..2 抗肿瘤作用
在无细胞体系中,瓜蒌子中瓜蒌素对完整细胞毒性很低,而对蛋白质生物合成有明显的抑制作用,与单克隆抗体缀合制备而成的免疫毒素对肿瘤有辅助治疗作用[10]。
2.2.3 抗菌作用
瓜蒌做成煎剂,可对体外对大肠杆菌、痢疾杆菌等有抑制作用,对溶血性链球菌、肺炎球菌等也有一定的抑制作用[11]。
2.2.4 祛痰作用
动物试验表明,瓜蒌中分离得到的氨基酸具有良好的祛痰效果[11]。瓜蒌中的半胱氨酸能使痰液黏度下降,有利于咳出。
2.2.3 其他作用
瓜蒌皮能增强免疫作用[12],瓜蒌子还有降血糖降血脂的功效,瓜蒌子油还有抗氧化作用,瓜蒌仁中的脂肪油具备较强的止泻作用。
2.3 瓜蒌的研究意义
2.3.1 多糖的提取方法
多糖的提取方法不仅影响多糖的含量和产量,并且影响其结构特征和生物活性[13]。为了提高多糖得率,提取多糖时常常使用一些辅助手段。目前提取多糖的方法有加热回流提取法、超声波辅助提取法、超高压提取法、微波辅助提取法、酶法等。
加热回流法:先搭好加热回流装置,然后对药材进行反复多次加热回流浸提。这是使用最多也是最为传统的提取方法,方法操作简单,避免了溶剂挥发。但是缺点是加热时间长,高温可能会导致多糖成分分解破坏[14],使多糖发生降解而影响生物活性,且增加能耗和设备投入。
超声波辅助提取法:原理是超声波空化效应产生的强大压力作用于中药材上,使植物细胞结构被破坏,溶剂快速进入细胞内,加快有效成分的溶解 [15]。该法有效成分得率高,减少耗能,提取更安全、方便,且提取液澄清。但是时间过长,瓜蒌杂质成分溶出增多,提取液黏度增大,不利于多糖的溶出,使多糖提取率下降。
超高压提取法:先对物料加压,然后突然泄压,造成细胞内外的压差急剧变化,导致细胞破裂,有效成分释放出来[16]。这种方法提取率高、周期短、操作简单、安全可靠、无污染、节能环保,其提取液杂质少且提高多糖分子可溶性和灵活性。但是会使大分子物质变性,不适用提取分子量大的多糖物质,影响提取物生物活性[17]。
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