白刺果中花青素的提取及含量测定(附件)
目 录
1 引言 1
1.1 白刺果概述 1
1.2 花青素及其生理作用 1
1.2.1 花青素简介 2
1.2.2 抗氧化作用 2
1.2.3 保护肝功能 2
1.2.4 抗肿瘤作用 2
1.2.5 抗癌作用 3
1.3 花青素的提取技术 3
1.3.1 有机溶剂萃取法 3
1.3.2 微波辅助法 3
1.3.3 水溶液提取法 4
1.3.4 其他提取法 4
1.4 花青素的分离纯化方法 5
1.4.1 大孔树脂吸附法 5
1.4.2 纸层析法 5
1.4.3 高效液相色谱法 5
1.5 花青素的含量测定方法 6
1.5.1 pH示差法 6
1.5.2 高效液相色谱法 6
1.6 实验的具体内容与意义 6
2 实验部分 6
2.1 实验材料 6
2.2 实验中所用到的试剂 6
2.3 实验中所用到的仪器 7
2.4 花青素的粗提 7
2.5 采用大孔树脂进行花青素的分离与纯化 8
2.5.1 大孔树脂的预处 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥
理 8
2.5.2 大孔树脂的筛选 8
2.5.3 洗脱条件的优化 9
2.6 pH示差法初步测量花青素含量 10
2.6.1 试剂的配置 10
2.6.2 供试品溶液的制备（花青素） 10
2.6.3 花青素供试品稀释溶液的制备 10
2.6.4 含量测定 10
2.6.5 计算 11
2.7 HPLC进一步纯化花青素样品 11
2.7.1 HPLC分离方法的筛选 11
2.7.2 HPLC纯化制备的花青素流出液的收集与分析 12
2.8 外标法检测花青素的含量 13
2.8.1 花青素标准品的制备 13
2.8.2 标准曲线的绘制 13
3 结果与讨论 14
3.1 花青素的粗提方法的选择 14
3.2 大孔树脂的筛选 15
3.3 洗脱条件的优化 15
3.4 花青素样品的进一步纯化条件考察 16
3.5 HPLC纯化制备的花青素流出液的收集条件考察 18
3.6 外标法检测花青素的含量 20
3.6.1 花青素标准品的制备 20
3.6.2 标准曲线的绘制 21
结 论 24
致 谢 25
参 考 文 献 26
1 引言
花青素在植物花瓣和果实，茎和叶的表面细胞和下表面分布广泛。它们属于酚类化合物中的黄酮类化合物，是水溶性色素。在自然条件下，花色苷通常与多种单糖结合，在植物中形成花色苷，称为花青素。其色泽随pH不同而改变，由此赋予了许多植物明亮而鲜艳的颜色。花青素具有改善血液循环、保肝功能、促进睡眠、软化血管、抗氧化、增强记忆力、抗癌、视觉保护、抗过敏、抗炎等生理功能。他们在医学上、化妆品和保健食品中有着广泛的用途[1]。在目前的研究中，花青素广泛存在于柑橘类水果、葡萄、蔓越莓、草莓、黑莓和其他浆果及蔬菜，如茄子、洋葱和胡萝卜中。花青素不稳定，易受pH、温度、紫外线、糖、有机酸、氨基酸、蛋白质和其他因素的影响而发生降解。近年来，随着人们对食品安全和自身健康的重视，花青素作为天然食用色素，与合成色素相比，具有较高的安全性、一定的营养价值和药理作用[2]，越来越受到人们的重视，成为研究人员的热门研究话题。
1.1 白刺果概述
白刺果为蒺藜科白刺属建群性的落叶灌木植物，由林奈1759年使用这个名称，分布在沙漠和半沙漠地区。中国主要分布在青海柴达木盆地。白刺属植物具有抗旱、耐盐、耐碱、耐沙、耐瘠薄、抗逆性强等特点，能防风固沙，是典型的沙漠植物。白刺能够固定自然界土壤中的氮素，从而增加土壤养分，改善土壤的营养状况，为其他的植物生长和生存创造条件，因此在保护生态环境中发挥着重要作用[3]。白刺果实是可食用的，有“沙漠樱桃”的名称，其果实含有大量的氨基酸和微量矿物质元素，可以加工成运动饮料；此外，白刺果具有滋阴润肺、健脾胃、舒神解毒、活血化血、治疗脾胃虚弱的作用，具有极高的药用价值和保健作用，发展价值极高[4]。经检测白刺营养成分相当丰富，具有很高的开发价值，白刺果的果皮中含有一定量的花色苷，但其粗提物中含量较低，需要进一步的分离纯化。相较其他的分离方法，大孔树脂吸附洗脱法具有选择性好、吸附量大、机械强度高的优点。吸附速度快、分离效果好、易再生，在天然产物工业化提取分离中有很大的用途。
1.2 花青素及其生理作用
1.2.1 花青素简介
花青素，又叫花色素，是一种水溶性色素。1835年被Marquart第一次使用anthocyanin这个术语，在植物花瓣、果实组织、茎和叶中的表层细胞和下部表皮有大量分布，它属于酚类化合物中的黄酮类化合物。由于花青素的存在，并且其色泽随pH不同而改变(酸性环境下偏红，在碱性环境中偏蓝），因而它给许多植物带来鲜艳的颜色。花青素是以2苯基苯甲酰阳离子为母体的衍生物。其结构如图1所示。
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