目的旨在对缢蛏多糖纯化组分的初步结构鉴定进行研究。方法分别采用苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、硫酸-咔唑法测定缢蛏多糖中的总糖、蛋白质和糖醛酸含量。采用红外光谱法分析缢蛏多糖中的主要官能团，并判断其糖苷键的构型；利用紫外光谱仪扫描来判断多糖纯化组分是否含有蛋白质、核酸等物质；采用气相色谱法对多糖纯化组分中的单糖组成进行分析；用高碘酸氧化和Smith降解来判断糖苷键的链接方式。结果缢蛏多糖纯化组分Ⅰ中总糖含量为84 %、蛋白质含量为3.1 %、糖醛酸含量为10.1 %；组分Ⅱ中总糖含量为80 %、蛋白质含量为3.4 %、糖醛酸含量为4.8 %。结论酸水解表明缢蛏多糖纯化组分Ⅰ、Ⅱ由半乳糖组成，为均一多糖。蛋白质、糖醛酸的含量相对较低，其多糖纯化组分结构具有多糖的特征吸收峰，存在α型构型，GC分析表明表明组分Ⅰ、Ⅱ均由主链为（1→4）-葡萄糖构成、支链为（1→6）-葡萄糖构成。关键词 缢蛏，多糖，理化性质，结构鉴定
目 录
1 引言 1
1.1 多糖的研究概况 1
1.2 多糖理化性质的研究 1
1.3 多糖结构的初步鉴定研究 1
2 课题研究的目的及内容 3
2.1 课题研究的目的 3
2.2 课题研究的内容 3
3 实验材料与方法 3
3.1 仪器与材料 3
3.2 纯化组分制备方法 4
3.3 理化性质的研究 5
3.4 化学结构的初步鉴定 7
4 结果与分析 9
4.1 理化性质的测定 9
4.1.1总糖含量分析结果 9
4.1.2蛋白质分析结果 10
4.1.3糖醛酸分析结果 11
4.2 化学结构的初步鉴定 12
4.2.1单糖组分分析结果 12
4.2.2多糖结构分析结果 14
4.2.3红外光谱分析结果 18
4.2.4紫外光谱分析结果 20
结 论 21
致 谢 22
参 考 文 献 23
1 引言
缢蛏(Sinonovacula constri *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072# 
cta Lamark)隶属软体动物门、瓣鳃纲、帘蛤目、竹蛏科，又名蛏子, 浙江称蜻、江苏称其为海蛏等。在日常生活中，常作为一种海鲜食材[1]。缢蛏肉鲜美清甜，丰腴脆嫩，药物功效显著，富含蛋白和多糖。《泉州.本草》中记载，蛏子肉清热解毒、消水肿、利小便、除烦[2]，蛏子肉可用于治疗产后的虚损、燥热口干、湿热水肿、小便不利、中暑泄痢等症状。
近年研究表明，这些药理作用与富含的多糖具有密切的联系，其良好的抗免疫活性和抗氧化活性也被证实。因此，对于缢蛏多糖[3]的分离纯化研究很有必要。研究还发现，多糖的活性与其自身结构及化学基团关系密切，因此，多糖的性质鉴定和结构解析是多糖的修饰及构效关系的前提。
1.1 多糖的研究概况
多糖（PS），又叫做多聚糖,它是由醛糖和（或）酮糖经过脱去水而形成糖苷键,并且由糖苷键或者其分枝连接构成的链状聚合物，是拥有丰富生物活性的天然大分子物质。多糖作为一大类天然产物，广泛分布在植物[4]、微生物[5]、动物[6]等有机体中。自从20 世纪 70 年代以来，科学家们就发现多糖及糖衍生物在生物体中不但能构成材料能量资源，更关键的是它存在于所有的细胞膜结构中，参与生命现象中的各个细胞的活动，具有各式各样的生物学功能[7]。多糖与细胞与细胞的识别、免疫功能的调节、癌症的诊断与治疗、细胞间物质的运输、等都有着非常密切的关系。除此之外它还具有调节细胞的生长和衰老、控制细胞的分裂和分化的作用。
1.2 多糖理化性质的研究
① 其基本的物理性质：提取纯化得到的多糖组分，观察其状态、颜色。
② 糖含量的测定：通过用苯酚硫酸法测定其糖含量。
③ 蛋白质含量的测定：通过使用考马斯亮蓝法测定多糖组分中蛋白质的含量。
④ 糖醛酸含量的测定：通过使用硫酸咔唑法来测定多糖糖醛酸的含量。
1.3 多糖结构的初步鉴定研究
因为多糖所具有的生物活性与它的结构有紧密关联，而多糖的结构又是非常复杂的[8]，因此对多糖进行结构鉴定具有重要的意义。多糖结构的分析手段很多，不仅有化学法（如酸水解、高碘酸氧化、Smith降解等）还有物理法（如高效液相色谱法、气相色谱法、红外光谱法、紫外光谱法等。1.3.1化学分析方法
高碘酸氧化法[9]和Smith降解，高碘酸氧化可用来对直链多糖的聚合度、糖苷键位置、支链多糖分支数目做出准确判断。而后者是将高碘酸氧化产物经硼氢化钾还原，还原产物多糖醇在室温条件下酸水解，选择性的断裂已被高碘酸破坏的糖苷键，得到小分子的多元醇和未被破坏的多糖或寡糖片断，并对这些产物进行组成分析，推断糖苷键的位置。
酸水解[10]是分析多糖链组成成分的主要手段,它主要包括完全酸水解、部分酸水解等。多糖水解后得到的产物可直接经液相色谱分析或是经衍生化后用于气相色谱分析。多糖经过部分酸水解之后得到的醇析产物往往是多糖的主链重复性结构的片段、糖醛酸链的片段，从这些小的片段中推测多糖链的一些结构特点。
甲基化分析氧化裂解[11]，该方法是用来确定糖残基间连接位置最常用的方法。首先是将多糖中的各种单糖残基中存在的游离羟基全部甲基化，然后再将甲基化多糖水解，水解后得到的化合物，羟基所在的位置即为原来单糖残基的连接点。最后，根据甲基化单糖的不同比例，从而推测键型在多糖重复结构中所占的比例。
1.3.2仪器分析方法
红外光谱分析法，是用来分析重要官能团并判断糖苷键的构型一种关键性方法。常用方法是将少量多糖样品，用溴化钾（KBr）压片在400 ~4000cm1区间扫描后进行IR分析[12] 。它可以帮助识别：呋喃糖与吡喃糖、判断糖苷键有哪些类型、糖的构型以及多糖链上羟基取代的具体情况等信息[13]，是鉴定糖结构研究不可或缺的手段之一。
紫外光谱法(UV) [14]，在多糖结构分析中主要是利用在260 nm、280 nm处观察有无吸收来判断多糖中是否有蛋白质,多肽及核酸。
气相（GC）和液相（LC）主要是应用于单糖与甲基化后单糖的分离和鉴定，用来为多糖的组分分析提供主要依据。GC必须要样品进行衍生化，而液相则可以直接进样。2 课题研究的目的及内容

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