目 录
1 引言 1
2 文献综述 1
2.1 总黄酮提取工艺 1
2.2 药理作用的研究 2
3 课题研究的目的及内容 3
3.1 课题研究的目的 3
3.2 课题研究的内容 3
4 实验部分 4
4.1 实验仪器与设备 4
4.2 实验材料与试剂 4
4.3 硝酸铝显色法 4
4.4 绘制芦丁标准曲线 5
4.5 蒿茶总黄酮的提取与测定 5
4.6 单因素实验 5
4.7 响应面实验 6
5 结果与分析 7
5.1 芦丁标准曲线 7
5.2 单因素实验结果 7
5.3 响应面实验结果 11
结 论 17
致 谢 18
参考文献 19
1 引言
金湖蒿茶是一种药食两用的养生保健佳品，被称为“江淮一宝”。蒌蒿被中医叫做茵陈。蒌蒿中含有铁、磷、锌、钙和维生素等多种矿物质元素，营养丰富。黄酮类化合物是蒌蒿的主要有效成分，具有很强的抗氧化[1]和抗菌抗肿瘤的作用。目前对于从蒿属植物中提取总黄酮的方法有很多的研究，有热回流法、水浴法、冷浸法、超声法、微波辅助提取法、索氏提取法、大孔吸附树脂法等。传统的热回流法、水浴法和冷浸法存在提取时间长，提取效率低等问题。而微波辅助、索氏提取法、大孔吸附树脂法等存在装置及操作复杂的问题。目前虽然已经有很多对蒿属植物中总黄酮提取方法的研究，但对于蒿茶中总黄酮的提取研究很少，不能为蒿茶的高效利用提供依据。
本文采用热回流法、超声法、冷浸法三种方法对蒿茶中的总黄酮的提取率进行比较，选出最合适的提取方法。针对超声法进行单因素实验和响应面实验，优化提取工艺条件，得到蒿茶总黄酮的最佳提取工艺。蒌蒿不仅有很高的食用价值，还有很高的营养和保健价值[2]，本实验得到了蒿茶总黄酮的最佳提取工艺，为蒿茶的高效利用提供理论依据。
2 文献综述
2.1 总黄酮提取工艺
近年来已有很多对蒿属植物中总黄酮的提取工 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: @351916072@ 
艺的研究，包括超声法、超临界二氧化碳萃取技术、大孔吸附树脂法、酶法、冷浸法等提取方法，通过对这些方法进行综合比较，找出最合适的提取方法。
2.1.1 超声提取法
王毓宁[3]等采用超声波乙醇法提取总黄酮，通过单因素实验和正交试验得出了芦蒿中总黄酮的最佳提取工艺，通过实验得出超声波乙醇法比乙醇法提取更加省时经济。
张德华[4]等将超声法、水浴法、索氏提取法三种方法进行对比提取总黄酮，分别进行正交试验。通过对超声法的方差分析和显著性试验得出影响因素的大小：为浸提剂>液固比>浸提剂浓度>超声时间；通过索氏提取法的方差分析和显著性试验得出影响因素的大小：水浴温度>回流时间>浸提剂>浸提剂浓度；通过水浴法的方差分析和显著性试验得出：水浴时间>浸提剂浓度>浸提剂>水浴温度。三种方法中，索氏提取法和超声法都优于水浴法。
2.1.2 超临界二氧化碳萃取技术
李志平[5]等采用超临界二氧化碳萃取技术(SCDE)提取黄酮类化合物。对萃取压力、萃取温度、CO2流量、萃取时间、夹带剂用量五个因素设计正交试验，得出最佳提取工艺，提取率为3.875 %。将超临界二氧化碳萃取法与冷浸法作比较，得出二氧化碳萃取法所提取的总黄酮较为纯净，品质好，提取率较高。
2.1.3 大孔吸附树脂法富集纯化
向海燕[6]等以总黄酮得率为考察指标，研究大孔吸附树脂法富集和纯化药材活性部位总黄酮的工艺参数和条件。比较4种不同极性大孔树脂富集纯化总黄酮的吸附性能。研究表明，树脂的极性越低、比表面积越大、孔径越小，树脂的吸附量越大。极性的大孔树脂对总黄酮的吸附效果较好，而非极性的大孔树脂的解吸能力要优于极性和弱极性的大孔树脂。因此，非极性大孔树脂更有利于总黄酮的富集纯化。
2.1.4 酶法提取技术
李娟[7]以总黄酮提取率为指标，采用酶法对总黄酮进行提取，并考察了酶用量、温度、乙醇浓度、提取时间、pH值等因素对总黄酮提取率的影响，研究测定了果胶酶和纤维素酶提取总黄酮的工艺，得出纤维素酶对总黄酮的提取率较高，因此常选择纤维素酶作处理酶。
2.1.5 冷浸法提取技术
陈新等[8]以芦丁为对照品，制作标准曲线，通过正交实验，确定了以乙醇为溶剂的蒌蒿中总黄酮的最佳提取条件，在此条件下黄酮的得率为 1.943 %。根据实验结果可得最佳提取条件为95 %的乙醇，温度为60℃，料液比为12∶1 mL/g，每次时间为3 h，在乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间，四个因素中，对得率影响的主次顺序为提取时间>提取温度>乙醇浓度>料液比。
2.2 药理作用的研究
目前对于蒌蒿的药理作用的研究表明蒌蒿有明显的补益作用、抑菌作用、降压作用，其乙酸乙酯部位有显著的抗病毒、抗肿瘤作用等，说明蒌蒿有很好的保健作用。
2.2.1 免疫促进作用
沈夕坤[9]等研究蒌蒿对小鼠的常压耐缺氧能力、常压耐高温能力、耐疲劳能力、耐高温能力、耐低温能力的影响，结果可知蒌蒿对这些能力都有显著的提高作用。因此可说蒌蒿对小鼠有很好的免疫促进作用。
2.2.2 抑菌作用
郑功源[10]等研究了蒌蒿对大肠杆菌、痢疾杆菌、巨大芽孢杆菌等细菌和真菌的抑制作用。研究表明，蒌蒿对细菌有较强的抑制作用，尤其是对痢疾杆菌有很强的抑制作用，对真菌抑制作用较弱。
2.2.3 抗乙型肝炎病毒

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