摘 要本文提出采用聚乙二醇（PEG）4000/(NH4)2SO4双水相体系从黑果枸杞中分离纯化多糖。首先采用水提醇沉法来提取黑果枸杞粗多糖，考察了两个因素，分别是液料比例和温度。实验结果表明当温度为50℃，料液比为130、时间为2.5h提取到的粗多糖最多。然后选用PEG4000/(NH4)2SO4对黑果枸杞多糖进行分离纯化，考虑了盐、PEG、多糖这三个因素。进行单因素实验，完成萃取条件的优化，选择最佳萃取条件。通过对实验数据的优化和计算，得到下相中多糖的回收率达到94.35%，蛋白质在上相中的残留率仅为11.23％，得到黑果枸杞多糖的双水相提取最佳工艺，开发出一种高效率、高纯度、绿色环保的提取方法。提取黑果枸杞中多糖成分对开发新药具有重要的实用价值和学术意义。
目 录
1 绪论 1
1.1黑果枸杞概述 1
1.1.1黑果枸杞 1
1.2黑果枸杞的分布 1
1.3黑果枸杞的成分 1
1.4黑果枸杞的药理作用 2
1.4.1降血糖作用 2
1.4.2抗氧化作用 2
1.4.3降低高血脂和预防心血管疾病 3
1.4.4增强免疫力 3
1.4.5其他作用 3
1.5国内外关于该论题的研究现状和发展趋势 4
1.6课题研究的目的和意义 4
2实验部分 5
2.1实验材料与仪器 5
2.1.1实验材料、试剂 5
2.1.2实验仪器 5
2.2实验方法及步骤 5
2.2.1黑果枸杞粗多糖的提取工艺流程 5
2.2.2双水相萃取体系 6
2.2.3多糖含量的测定 7
2.2.4蛋白质含量的测定 8
2.2.5单因素实验 9
2.2.6单因素对双水相萃取率的影响 9
3结论 17
参考文献 19
致谢 21
1绪论
1.1黑果枸杞概述
1.1.1黑果枸杞
黑果枸杞常年生长在高山沙地、河床，是我国西部地区重要的沙漠药用植物。它是一种分枝较多的 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
小灌木，树高普遍在50cm左右；树枝质地坚硬且伴有不规则纵条纹，花叶簇生，叶肉肥厚，顶端钝圆，基部渐狭；花梗细瘦其花萼形似狭钟状，花冠形状似漏斗状，花色为淡紫色且裂片一般为矩圆状或椭圆形；花柱和雄蕊长度等长。新鲜果实呈球形，成熟后为紫黑色，顶部凹陷，种子呈肾形，褐色，内含512颗果籽，510月开花结果。
1.2黑果枸杞的分布
作为近几年来比较热门且重要的野生植物资源，黑果枸杞主要分布在我国的宁夏、甘肃、青海东部、新疆和西藏等多个地区，其中在国外也有分布，如欧洲、中亚等。从它分布情况能看出黑果枸杞生长地区都是在盐碱土荒地之中、河床沙漠、盐化沙地，属于干旱寒冷地区，耐旱抗冻，生命力非常顽强。
1.3黑果枸杞的成分
宁夏枸杞，成熟黑果枸杞的果实为紫黑色。黑果枸杞既是食品又是药品，其营养价值很高。枸杞主要由多糖、蛋白质、脂肪、维生素这些化学成分组成，此外矿物质元素、生物碱类、有机酸类、黄酮类等含量也是很高的[1,2]。黑果枸杞多糖能有效地调节人体，是一种很好的生物调节剂，也发挥着最重要的功能。黑果枸杞多糖是一种水溶性多糖[3,4]。含有较多的还原多糖和天然色素类物质，其中普通红枸杞没有花青素，花青素是黑果枸杞独有的。黑果枸杞中的多糖含量最高，高达10.89%，药用价值大大高于普通红枸杞，因此被誉为“软黄金”[5,6]。
1.4黑果枸杞的药理作用
枸杞是中国传统的滋补性中药，其味甘、性平，有滋肾补髓、养肝明目的作用。黑果枸杞功效已经在大量的医学研究中得到证实，具有较高的药用价值同时还兼具极高的食用价值，它在药理方面的作用主要有降血糖、抗氧化、降低高血脂和预防心血管疾病、增强免疫力等。
1.4.1降血糖作用
汪建红等研究者早在2009年用黑果枸杞多糖提取液给小鼠灌胃，研究不同浓度黑果枸杞多糖对预防和治疗作用糖尿病有没有效果[7]。经过大量实验得到证实,患有糖尿病小鼠的血糖含量和MDA含量能显著被黑果枸杞多糖降低并取得很好的疗效,而且糖尿病小鼠血清和肝脏的SOD活性也显著增强，但效果低于二甲双胍。SOD是机体清除氧自由基的一种重要的活性酶，其数值越高，直接代表抗氧化能力越强；MDA能够间接发挥抗氧化能力，二者通过减少自由基对胰岛B细胞的损伤，从而保护胰岛B细胞，能够有效降低血糖。因此黑果枸杞多糖对于预防和治疗糖尿病都能够起到一定的疗效。
1.4.2抗氧化作用
抗氧化作用的食物有很多,但黑果枸杞是众多抗氧化食物中的佼佼者，抗氧化能力指数(ORAC)高达587μmol TEg1[8]。天然花青素的发现对于抗氧化作用是一个重大突破，也是最简单有效的方法，它能被人体全部吸收，并发挥作用较长时间。黑果枸杞多糖对于人体具有抗氧化作用的能力,主要功效就是能够对抗自由基过氧化，减少自由基对于人体的伤害[9]。马丽艳等研究者通过大量的动物实验发现,小鼠红细胞溶血现象能被黑果枸杞里面所含有的大量花色苷得到有效地抑制,由此小鼠血清抗氧化活性能力在一定程度上得到了相应的增强,得出了一定的量效关系[10]。总黄酮中的类黄酮参与激活抗氧化酶的活性和消除自由基，能够增强抗氧化作用,有效地抑制小鼠过氧化产物MDA生成[11]。崔笑梅等研究者通过大量实验发现,黑果枸杞对于训练过度所导致的机体内环境失衡具有良好的调节作用，通过抑制MAPK信号所表达出的蛋白质,MAPK信号转导系统被激活从而诱导抗氧化酶基因表达,提高机体骨骼肌的氧自由基清除能力,能够减少抗氧化应激所带来的伤害[12]。
1.4.3降低高血脂和预防心血管疾病
黑果枸杞黄酮及花色苷等有效成分可以治疗高血脂,且预防和治疗动脉粥样硬化和心血管疾病。高三酰甘油、高脂血症小鼠血浆血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量都能通过黑果枸杞总黄酮得到不同程度降低,同时黑果枸杞总黄酮还能升高，降低高脂饲料诱发严重体重增加,并且能让脏器不受到伤害[13,14]。林丽等人用黑果枸杞花色苷对高脂血症模型小鼠进行灌胃处理,发现小鼠血脂水平显著降低，尤其是在体重及Total Cholesterol(TC)、Triglyceride(TG)和Low Density Lipoprotein（LDL）的含量有显著变化,但是HDLC含量会在原来的基础上有所增加[15]。病理形态学检查发现，花色苷能有效对atherosclerosis（AS）形成进行干预，同时能够减小atherosclerosis（AS）形成进行干预。不同浓度的花色苷能降低氧化Low Density Lipoprotein（LDL）对血管内皮细胞的损伤。
1.4.4增强免疫力

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