peg4000na2so4双水相萃取黑果枸杞多糖的研究
目 录
1 绪论 1
1.1黑果枸杞概述 1
1.2黑果枸杞多糖 1
1.3多糖提取 2
1.4双水相萃取 3
1.4.1双水相萃取概述 3
1.4.2常见的双水相萃取体系 4
1.5研究内容及选题意义 5
2 实验部分 7
2.1实验材料及仪器 7
2.1.1实验材料、试剂 7
2.1.2实验仪器 7
2.2实验方法及步骤 7
2.2.1粗多糖的提取 7
2.2.2溶液的配置 8
2.2.3标准曲线的绘制 9
2.2.4双水相萃取（单因素试验） 10
3 结果与分析 12
3.1粗多糖提取单因素试验 12
3.1.1料液比对于提取结果的影响 12
3.1.2提取时间对于提取结果的影响 12
3.1.3提取温度对提取结果的影响 13
3.2双水相萃取单因素实验 14
3.2.1盐含量对于萃取结果的影响 14
3.2.2 PEG4000的加入量对于萃取结果的影响 15
3.2.2黑果枸杞粗多糖溶液的加入量对于萃取结果的影响 16
4.结论 18
参考文献 19
致谢 22
1 绪论
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1黑果枸杞概述
黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr）及黑枸杞，茄科类植物，属于落叶小灌木，药用以及食用的部分为其成熟果实被称为枸杞或枸杞子。枸杞在我国全国各地均有野生，主要分布在我国以及欧洲中亚，我国为枸杞的主要产地，同时我国也是枸杞出口的大国[1]。对于枸杞的开发研究，很多的研究者对黑果枸杞多糖的活性以及功效进行了大量的研究，因此，本次的实验研究对象为黑果枸杞多糖，并将提取得到的黑果枸杞多糖进行分离和纯化。
枸杞大致可以分为黑果枸杞与红果枸杞两种类型。这两种类型的枸杞所含的成分略有不同，其营养价值于药用价值也不尽相同。枸杞多糖是红果枸杞的主要成分，有免疫调节以及延缓衰老等作用[2]。黑果枸杞除多糖含量少于红果枸杞外，其氨基酸，甜菜碱以及黄酮的成分均高于红果枸杞[36]。因此相对于红果枸杞来说，黑果枸杞的价值略高[7]。
有中医药师认为，黑果枸杞的成分使其具有了相当强大的作用。有史书记载黑果枸杞可以用于心热病，月经紊乱等疾病的治疗[8]。黑果枸杞中蕴含着多种多糖以及人体所需的维生素以及大量的微量元素等营养物质[9]，具有很高的药用以及食用价值，因此可以说黑果枸杞是大自然给予人类的一大礼物。
1.2黑果枸杞多糖
黑果枸杞的化学成分极为复杂，如多糖，蛋白质，花青素，亚油酸等[10]。黑果枸杞中的花青素含量也较高，且为一种强抗氧化剂，为紫红色，属花色苷类色素，具有较高的食用价值[11]。其中多糖为黑果枸杞中的主要有效成分之一，具有增强免疫力、抗癌、抗氧化、防衰老等作用，是一种重要的生物调节剂[12]。黑果枸杞中多糖的成分较多，目前已确定在黑果枸杞中存在着六种结构不同的单糖[1314]。其中的六种水溶性多糖的摩尔比为0.65:10.71:0.33:0.67:1:10.41[15]。
经研究者发现，黑果枸杞多糖可以降低血糖以及抗疲劳。其抗疲劳主要通过肝糖合成的增加，来促进体内葡萄糖的代谢和吸收。对于抗疲劳作用主要体现在可以增加肝糖原以及肌糖原的储备量，从而可以用来提供能量。这就可以说明，黑果枸杞多糖的重要功效。
正是因为黑果枸杞的药用以及食疗价值，因此目前在世界上有越来越多的研究者在对黑果枸杞化学成分以及目前还尚未发现和开发的有效成分进行研究。黑果枸杞的药用以及食用价值在未来的价值都不可估量，因此需要更多的研究者来对黑果枸杞的有效成分进行更深刻，更全面，更广泛的研究来使其得到更完善的开发和利用。
1.3多糖提取
现在，有越来越多的方式可以实现多糖的提取，微波提取，超声提取和传统的水提是被研究者经常采用的几种提取方法。
结合了微波和溶剂提取法的提取方法被称为微波提取法，其主要采取了微波的热效应，且可以在极短的时间内完成提取。对于中药有效成分提取方面主要包括两个方面，一是破坏细胞壁使其溶出；二是增加其溶解度，来使提取更加完全。微波提取法具备以下特点：操作简单，所需时间短；溶剂的种类多，且所需量较少，回收率较高；过程安全，能耗较低。但是仅适用于与对热稳定的物质，因此具有一定的局限性。
例如单绍军等[16]采用了微波提取法对半枝莲中的黄酮进行提取，分别对微波功率，提取时间以及溶剂等因素来对提取的效率进行考察。最终得到了最佳的提取工艺：微波功率被控制在500w左右，时间被控制在10min，以浓度为85%的乙醇（60mL）进行提取。提取的效率是2.9%。
超声波提取法是通过超声波的机械以及热效应的原理，使分子的运动速度加快以及穿透力增强，从而加速了药物的有效成分的溶解及分散，来增大其提取率。除此之外，它还可以使完整的植物细胞被破坏，使得有效成分被很好的提取出来。与其他的提取方法相比，该方法具有以下优点：物质溶出速度快，易操作，提取受益好；适用于对热敏感的物质的提取；可以保证物质结构的稳定性；溶剂用量少；提取得到的有效成分的含量更好，有利于进一步操作。但它在大规模提取时的效率很低，不利于工业放大。
例如郝经文等[17]采用该方法来对蕨菜多糖的提取工艺来进行研究，他们考察了原料与溶剂的配比，提取次数，时间以及功率等因素对于提取结果的影响，以确定最佳的提取工艺。在此工艺条件下，蕨菜多糖的提取率为8.6%。
热水提取法是使用一定的溶剂，在一定的温度下将药材中有效成分进行提取的一种方法。这种方法适用于，水溶性且对热稳定的物质的提取，具有实验简单，易于操作的特点。但是除了我们所需要的成分外，热水提取法往往会带有一些其他的水溶性的杂质，且高温会使部分物质的结构和性质发生改变。
例如刘晓敏等[18]采用了热水浸提的方法来对金针菇多糖进行提取，分别考虑了浸提时间，温度以及固液比这三个因素对于提取结果的影响，最终通过响应曲面得到最佳的提取工艺，在此工艺下，多糖的提取率为3.82%。
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