女贞子中黄酮类化合物的提取及其抗氧化活性的研究
目 录
1 概 述 1
1.1 研究目的及意义 1
1.2 女贞子的概述 2
1.2.1女贞子原植物形态 2
1.2.2女贞子药材形态 2
1.3 女贞子药理作用及临床研究进展 2
1.3.1 抗骨质疏松 2
1.3.2 抗肿瘤 2
1.3.3 保肝作用 3
1.3.4 免疫调节作用 3
1.3.5抗衰老作用 3
1.4 黄酮类化合物的研究进展 4
1.5 黄酮类化合物的提取方法 4
1.6黄酮抗氧化活性的研究 4
2 实验 5
2.1 实验材料仪器与试剂 5
2.2 女贞子总黄酮提取工艺设计 6
2.2.1 女贞子总黄酮的提取工艺 6
2.2.2 芦丁标准曲线的绘制 6
2.2.3单因素实验 6
2.2.4 响应面法实验设计 7
2.2.5 女贞子总黄酮提取量 7
2.3 抗氧化活性试验 7
2.3.1 测定DPPH自由基清除率 7
2.3.2 还原能力的测定 8
3 实验结果与分析 8
3.1 单因素实验 8
3.1.1乙醇体积分数的影响 8
3.1.2 提取时间的影响 9
3.1.3提取料液比的影响 9
3.1.4提取功率的影响 10
3.2 BOXBEHNKEN实验 11
3.3 抗氧化活性试验 16
3.3.1 DPPH自由基清除能力 16
3.3.2 还原能力 16
3.4 讨论 17
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结 论 18
参 考 文 献 18
致 谢 20
1 概 述
1.1 研究目的及意义
本文参照《中华人民共和国药典》2015年版一部附录黄酮测定法，通过研究女贞子，以其黄酮提取量为标准，通过进行响应面试验，选出最佳的提高女贞子中黄酮产率的工艺方法[1]，旨在为进一步开发利用女贞子中黄酮类化合物提供技术支持。此外，研究女贞子总黄酮的体外抗氧化活性，提升女贞子的利用价值，为社会创造更多的效益。
女贞子分布广泛，极易种植，成活率高，产量极高，在我国资源丰富。在中华传统医学记载中，可以益气补肾,有黑发明目的神奇功效,常常用来治疗肾虚肝功能损伤, 头发过早花白,视力低下, 腰膝酸软，四肢乏力，清热降火[2]。
女贞子的生物活性多种多样：1.抵抗炎症；2.抑制病菌；3.使血糖降低；4.使血脂降低；5.保护肝脏；6.防止血栓的产生；7.抗肿瘤等[3]。女贞子中的黄酮类化合物,经研究有着医治肿瘤、延缓衰老防治心血管疾病的疗效[4]。所以对女贞子进行开发研究,深入挖掘女贞子的药用价值,对社会来说意义重大。
抗氧化实质是清除自由基。自由基随时随地都会产生，它就存在于我们日常生活中，跟我们如影随形，环境污染也是产生自由基的一大诱因，而且平时的紫外线照射也会产生自由基。自由基给我们带来很多困扰，像癌症、衰老等疾病的产生其中一部分原因就是自由基。这时候，我们对于抗氧化的需求就十分明显。抗氧化作用机理：1.破坏自由基的组织结构；2.抢走生成自由基所需要的的物质[5]。可以说，抗氧化的重要性是不能不引起我们重视的，为什么有的人衰老的比较慢，而有的人衰老得快，就是因为每个人自身的抗氧化能力是不同的，当我们抗氧化的能力越弱时，衰老得就会越快。因为自由基会导致细胞死亡或变异。阻碍了身体的正常机能。如果体内长期受到过量自由基的攻击，患上严重疾病的机会大幅增加，就像心血管疾病、癌症、帕金森症这种重疾，还有衰老的问题。研究抗氧化可以规避这些害处，所以抗氧化是现代科研人员研究的一大热点，也是社会迫切需求的。
1.2 女贞子的概述
1.2.1女贞子原植物形态
女贞植物平均高6m。一般在秋季会结出女贞子果实，果实为椭圆形，有的两端稍微弯曲，果实成串形似葡萄，果实未成熟时为深绿色，成熟时果实为蓝黑色，表面有一层白粉[6]。女贞在盛夏时开花，开花时花朵分布密集呈簇状，花朵的样子酷似喇叭，分为四瓣。叶子是卵形，尖端锐利，尾部圆滑，整体为深绿色，光滑无毛，叶成对排布。植物茎秆是灰褐色的，表面光滑，有斑点[7]。
1.2.2女贞子药材形态
女贞子药材是经过干燥处理后的果实，整体为蓝黑色椭圆形果实，有的两端稍微弯曲，平均长8毫米，直径3毫米左右。外皮干燥后不光滑；手感较硬，横切开后大多只有一个果核，果核的外面跟女贞子同色，里面是灰白色。没有特殊气味，使用口感先微甜后微微发苦，上品女贞子果大且饱满，颜色为纯正蓝黑色，质地较硬不容易捏烂[8]。
1.3 女贞子药理作用及临床研究进展
1.3.1 抗骨质疏松
在中华传统医学中，女贞子对于骨质疏松症疗效很好。骨质疏松患病后的症状为：1、骨强度降低容易骨折；2、骨头重量减轻；3、骨组织结构发生变化。研究表明，绝经后妇女一定量服用调配的女贞子，可以增加骨强度，用来预防骨质疏松[9]。老年人长期服用女贞子，可以达到强身健体的效果，弱化年龄增长造成的骨钙质流失的问题，避免日常磕碰造成骨。治疗骨质疏松症的步骤：第一步克制破骨细胞使其失活，第二步调整钙平衡，从而促进骨矿化达到抗骨质疏松的目的。
从古至今，人们对于抗骨质疏松问题都非常重视，如何对抗骨质疏松是全人类都关心的。经过众学者对女贞子多年的临床研究，发现其对不同原因导致的骨质疏松的效果都非常显著，结合多种靶点深入病灶，其药用价值显而易见。
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