超声法提取长春七多糖工艺研究
目 录
1 绪论 1
1.1 长春七概况 1
1.2 长春七的化学成分研究 1
1.3长春七药理作用研究 1
1.3.1 抗菌作用 1
1.3.2 镇痛治疗作用 1
1.3.3 抑制作用 1
1.4 多糖提取工艺研究 2
1.4.1 水提醇沉法 2
1.4.2 微波提取法 2
1.4.3 超声波辅助法 2
1.5 课题研究目的 3
2 实验部分 4
2.1 实验仪器 4
2.1.1 试药 4
2.1.2 实验仪器与设备 4
2.2 多糖的制备 4
2.3 含量测定 4
2.3.1测定最大吸收波长 4
2.3.2供试品溶液的配置 4
2.3.3标准曲线的绘制 5
2.3.4 长春七多糖的含量测定 5
2.4 单因素实验设计 6
2.4.1 料液比 6
2.4.2 超声提取时间 6
2.4.3 超声温度 6
2.4.4 超声功率 6
2.5 单因素结果 6
2.5.1 料液比对长春七多糖提取率的影响 6
2.5.2 提取时间对长春七多糖提取率的影响 7
2.5.3 超声温度对长春七多糖提取率的影响 7
2.5.4 超声功率对长春七多糖提取率的影响 7
2.6 响应曲面法优化单因素 8
2.6.1 分析及设计实验 8
2.6.2 响应面结果分析 8
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2.7 响应曲面图谱分析与优化 11
2.7.1 响应曲面图谱分析 11
2.7.2 响应面优化结果 13
3 总结分析 15
参考文献 16
致 谢 18
1 绪论
1.1 长春七概况
长春七［Libanotisbuchtormensis(Fisch) DC］[1]，隶属伞形科岩风属，它也是陕西“太白七药”之一[2]，主要编撰在陕西中药材相关书籍中。长春七的药用部分是根茎。它是一种草药，主要具有散寒祛湿的功效。临床多用于感冒，牙痛、关节疼痛，瘀伤和风湿等症状的治疗，也可用于解决金牛七的中毒[3]。
1.2 长春七的化学成分研究
有关长春七的研究，于Troshchenko等[4]实验发现长春七根部含有D甘露醇开始。Ermatov等[8]设计实验从长春七中分离出异欧前胡素，香柑内酯，xanthogalal ，xanthogalin和buchtormin ( (+)3β,β二甲基丙烯酰基2,2二甲基3,4二羟基毗喃香豆素)。
国内研究长春七主要集中于陕西学术界。陕西中医药大学的王长岱等 [5,6]率先通过实验探索发现，长春七中具有sesibrcin、蛇床子素(osthol)、β谷甾醇等多种化学成分。倪文骐等7]研究出长春七含萜类、酯类化合物。闫涵威[9]等利用先进科学技术研究出长春七多糖的相关构成：甘露糖鼠李糖葡萄糖醛酸阿拉伯糖岩藻糖(17.2∶1.0∶18.0∶38.6∶16.2)。
1.3长春七药理作用研究
1.3.1 抗菌作用
葛晓晓等人[10]对长春七根的抑菌作用进行了研究，实验结果表明长春七根具有一定的抗菌作用。
1.3.2 镇痛治疗作用
陈光娟等人[11]通过进行鼠类动物实验和临床研究，发现并验证了长春七根部部分的治疗作用：与盐酸哌嘧啶产生拮抗作用，降温消炎治疗关节炎等。石娟等[12]还发现了长春七含有与镇痛相关的活性成分，经过实际的反复检验，明确可降低因鼠类疾病引起疼痛感的病症。
1.3.3 抑制作用
通过细胞膜层析筛选，张宇洁等[13]获得抑制HeLa细胞增殖的长春七的活性成分。
1.4 多糖提取工艺研究
多糖是由多个单糖分子缩合，并通过糖苷键结合的糖链，是生物体内重要的信息分子之一，具有多重的生物活性，对维持生物体机能有重要的作用。尽管学术界证实植物多糖具有活性，但对多糖的提取方法和工艺仍不够成熟，基于高效、高质、经济等多方面的考虑，各种方法的探讨比较依然是目前的研究焦点，现将常见的几种多糖提取方法予以说明。
1.4.1 水提醇沉法
水是大自然中最普通广泛的提取溶剂，因此常见于植物多糖的提取工艺里。水提醇沉法原理简单：高浓度的乙醇通过降低多糖水溶液的介电常数使其脱水，最终达到分离纯化目的。值得注意的是乙醇浓度越高，能够沉淀多糖分子量的数量就越小。要避免低聚糖等物质被析出影响得率，实验前期一定要正确把握被提取物和乙醇浓度的关系。
1.4.2 微波提取法
微波提取法主要是利用高频微波大量产热，破坏生物体内部结构，使得有效成分溶出的过程。该方法具有操作简便、高效的特点，在中草药有效成分提取研究中已经进行了广泛的应用。王自军等[14]学者首次采用了微波技术提取出了白芥子中的多糖，经过对照实验证实了微波提取技术会加快反应速度,增加产量。半枝莲[15]、金樱子[16]、知母[17]等植物运用微波技术可加速所含多糖的提取也已被报道。
1.4.3 超声波辅助法
超声波辅助法主要是依据物质的某些特性在超声波作用下溶出，与溶剂混合后依需求处理，最终得到单体化学成分的一项新技术。李军生等[18]发现，超声处理大大缩短了南瓜多糖的提取，探究过程还发现在一定范围内增大超声波功率，最终得到的南瓜总糖、还原糖和多糖的产量也随之提高, 这说明了温度协同超声波会加快反应作用，提高南瓜多糖的提取率。
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