超声波法辅助提取黄精种子中总皂苷的工艺优化研究
目 录
1 绪论 1
1.1 黄精的研究目的及意义 1
1.2 黄精、总皂苷研究进展 1
1.2.1 化学成分的研究 1
1.2.2 药理活性的研究 2
1.3 总皂苷提取工艺研究进展 3
1.3.1 超声波法 3
1.3.2 微波法 3
1.3.3 高效液相色谱法 4
1.3.4 超声表面活性剂萃取法 4
1.4 响应面法 4
1.5 工艺流程设计 5
2 实验方法 6
2.1 实验仪器 6
2.1.1 实验器材 6
2.1.2 实验药材和试剂 6
2.2 总皂苷的含量测定 7
2.3 制备标准品溶液 7
2.4 波长的选择 7
2.5 单因素实验 7
2.6 响应面法优化 8
3 实验结果与分析 9
3.1 绘制皂苷标准曲线 9
3.2 单因素对总皂苷含量的影响 9
3.2.1 提取时间对总皂苷含量的影响 9
3.2.2 乙醇浓度对总皂苷含量的影响 10
3.2.3 料液比对总皂苷含量的影响 11
3.2.4 提取功率对总皂苷含量的影响 11
3.3 黄精种子总皂苷提取工艺优化 12
3.4 实验验证 15
结 论 17
参考文献 19
致 谢 21 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ¥351916072$
1 绪论
1.1 黄精的研究目的及意义
黄精是百合科多年生植物黄精的干燥根茎,分布广泛,有悠久的药用历史,黄精中含有多种有效成分,现代临床用于治疗多种疾病。中国药典规定黄精[1]正品是:黄精,滇黄精和多花黄精。黄精分布广泛[2],像河南、湖北、四川、广西、云贵地区都有分布。《名医别录》[3]中最早出现黄精这个词语,李时珍写的《本草纲目》[4]里面讲:黄精对五脏有益处,还可以除风湿,补气。大量研究数据发现,黄精中有效成分有:黄酮、多糖、氨基酸、皂苷,等。黄精有很多疗效[5],对很多疾病都有作用,具有抗衰老抗氧化、降血糖、抗菌抗病毒、抗肿瘤、抗抑郁、抗动脉粥样硬化、抗抑郁、增强免疫力、防止老年痴呆和改善记忆力等作用。
黄精中有效成分很多,拥有的药用价值较高,若能够进行合理的开发利用,打开消费市场,将黄精大面积推广种植栽培,黄精将会成为一种经济作物,从而带动经济发展。黄精种子含有多种有效成分,如皂苷、黄酮、多糖等。前人虽然对黄精有较深入的研究,但是文献中大多研究的是黄精根部,黄精种子虽为黄精的一部分,却是在本课题之前国内和国外的人对它进行的研究较少,也从来没有加以利用,造成了资源的浪费。因而对黄精种子加以研究并且将它投入到医药行业一定有很广阔的应有前景,可以用它来造福人类。
当代提取总皂苷通常采用醇提水沉法、酸水解有机溶剂提取法、微波法、色谱法等,当代工艺研究侧重于提取工艺的研究,不断优化提取工艺,提高提取的含量。本文侧重于研究黄精种子总皂苷的提取方法,研究其提取最佳工艺,为黄精种子开发提供依据。
1.2 黄精、总皂苷研究进展
1.2.1 化学成分的研究
黄精多糖,可以治疗许多疾病,含量最多,主要活性成份。黄精的甾体皂苷,在黄精中非常具有代表性,可以说是黄精的代表性成份。黄精中还含其他成份,如:三萜皂苷、黄酮、生物碱类、木脂素类、甾醇类及果糖等[2]。
1.2.2 药理活性的研究
黄精是我国传统中药,使用频率高,疗效显著,产地分布广泛。黄精在道家[6]养生药材中排名靠前,被道家称为“养生圣药”,受众人所推崇,它可以补肾益肝、延长寿命。因为含有多种微量元素、黄酮、木脂素、多糖、氨基酸、皂苷、维生素、生物碱等,所以他的营养价值和药用价值较高,具有很深远的研究意义。黄精是我国传统中药,所以国内的各大研究机构都对它进行了较深入的研究,但是国外对黄精的了解还不够深入,目前只处于认识了解阶段。
1.2.2.1 抗肿瘤作用
张紫薇[7]等人实验发现,薯蓣皂苷可参与细胞的很多生物学过程,癌细胞同样有着正常细胞的各个生物过程,所以薯蓣皂苷可以对癌细胞的生命进程进行干涉,从而达到抗癌效果。
1.2.2.2 抗衰老、抗氧化作用
王烙佩[8]等人对竹节参总皂苷进行研究,研究表明竹节参总皂苷可以有效抑制心肌细胞凋亡,延长细胞周期,保持细胞的年轻态。此研究为进一步阐明竹节参总皂苷具有延缓衰老的作用作出证明,能够为抗衰老研究提供研究依据。
郑琦[9]等人用小鼠作为实验对象,对竹节参总皂苷进行研究,发现:H2O2会导致心肌细胞LDH的产量升高,而加入TPJS可以降低LDH的产量;同时发现,小鼠在游泳情况下,体内谷胱甘肽和脑肝中的SOD活性都能够被TPJS升高。此实验证明了:TPJS可以使物质抗氧化能力增强,具有抗衰老的作用,可以为抗衰老的研究提供研究基础。如果能够合理的应用到人类抗衰老的研究中,将对人类抗衰老、延长寿命作出贡献。
1.2.2.3 对心脑血管的保护和调节作用
王烙佩[8]等人通过对竹节参总皂苷的研究,发现:竹节参总皂苷能够保护正常衰老大鼠心肌细胞,且效果显著,猜想:它的作用机制是通过激活自噬过程,有效地减轻缺血所导致的心肌损伤,从而恢复心功能,并且能够显著地抑制急性缺血、心梗导致的心肌细胞凋亡。此实验证明了竹节参总皂苷对心脑血管有保护作用,如果能够科学的加以研究和利用,可以在治疗心脑血管病方面作出巨大贡献。
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