金银花中黄酮类物质的提取及其抗氧化活性的研究
目 录
1 绪论 1
1.1 金银花的研究概述 1
1.1.1 金银花中的化学成分 1
1.1.2 金银花的药理作用 2
1.2 黄酮类化合物的研究 4
1.2.1 黄酮类化合物的概述 4
1.2.2 黄酮类化合物的提取方法 4
1.2.3 黄酮类化合物的生物活性 5
1.3 黄酮类化合物的抗氧化活性及其构成之间的关系 6
1.3.1 C2、C3位双键与C环电子性质 6
1.3.2 羟基的数目 6
1.4 黄酮类化合物的应用 6
2 实验 7
2.1 实验材料 7
2.1.1 仪器及材料 7
2.1.2 材料预处理 7
2.2 标准溶剂的配制 7
2.2.1 试剂的配制 7
2.2.2 波长的选取 8
2.3.3 标准曲线的绘制 8
2.3 金银花中黄酮的提取工艺 8
2.4 单因素实验 8
2.4.1 液料比对黄酮提取率影响 8
2.4.2 超声温度对黄酮提取率影响 9
2.4.3 超声时间对黄酮提取率影响 9
2.4.4 超声功率对黄酮提取率影响 9
2.5 金银花中黄酮的提取率的计算公式 10
2.6 响应曲面实验设计 10
2.7 金银花中黄酮的抗氧化活性实验 10
2.7.1 清除DPPH能力测定 10
2.7.2 清除ABTS 自由基能力测定 11
3 实验结果分析 12
3.1 芦丁标准曲线 12
3.2单因素实验结果 12
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3.2.1 液料比对黄酮提取率影响 12
3.2.2 超声温度对黄酮提取率影响 13
3.2.3 超声时间对黄酮提取率影响 13
3.2.4 超声功率比对黄酮提取率影响 14
3.3 响应面实验的结果分析 14
3.3.1 响应面实验 14
3.3.2 响应曲面法 15
3.3.3 回归模型方程 16
3.3.4 影响黄酮提取率的响应面因素图 18
3.3.5 实验验证 19
3.4 金银花中黄酮的抗氧化能力 20
3.4.1 清除DPPH自由基的能力 20
3.4.2 清除ABTS自由基的能力 21
3.5 结果分析 21
结 论 22
参考文献 23
致 谢 26
1 绪论
1.1 金银花的研究概述
金银花隶属于忍冬植物的花蕊[1]，是大量具有相同药材和食物来源的中药材。它在中国许多地区被广泛耕种，在河南、山东等地药材的质量均属上乘[2]。它在进入人的心、肺、胃等人体器官的功效有清热去毒、消炎、滋补阴风、攻治于胀气、热毒症状，丹毒以及肿瘤等病症[3]。金银花的用药效果和强身滋补作用所涉及的范围很广，也是社会所缺的重要物质。
1.1.1 金银花中的化学成分
（1）有机酸类
它是有氧过程中依附于莽草酸所产生的一种化合物[46]。金银花中最重要的有效成分是咖啡鞣酸，也是探究最多的成分。多种异构体组成了各类的绿原酸混合酸，形成了七种异构体。绿原酸经过水解而产生的一种酸称之为咖啡酸[7]。此外，金银花中还含有棕桐酸[89]。
（2）挥发油类
七十余种挥发油从金银花中而得，但主要功能油为樟醇(Linalool)和十六烷酸(Hexadecanoic acid)。金银花中有60余种挥发油存在于干花中[10]，棕榈酸是其重要物质，所占比在挥发油的26%甚至更多，余下物质主要为有机物质，比如醇类、酯类和烷烃。总挥发油的45.5%往上都是芳香醇[1113]。单萜类化合物存在于金银花的芽和茎部位，含量较多的成分是香叶醇、卡宾、芳樟醇[14]，许多的挥发油位于金银花的果肉中，有各种化合物，例如羟类、烃类、萜类等有机化合物。其中萜类化合物的含量为5.26/mg/kg。肖敏等[15]在提取金银花叶的挥发油中应用蒸馏的方法，用气相色谱质谱法成功把二十多种化合物的含量从将其提取出来。
（3）黄酮类
近些年来，研究人员通过不懈努力，频繁地寻求金银花中一系列黄酮类化合物。例如飞燕草素、金鱼草素、葛根素、芦丁等诸如此类的重要元素[16]，得到良好的科学研究进展。在此发现，金银花树在不同时节的修理剪裁的过程中都会有黄酮存在，但是各部位枝节黄酮的含量差别是很大的，枝节点和花叶中的含量是最高的，随之含量排其后的是花蕊，茎则是最少的而且经发现当地所产的忍冬花的黄酮含量远远高于比非当地所产的含量[17,18]。刘昌平等[19]在研究中所知，黄酮类化合物占金银花的干重比例非常大，约70%。显然可见，黄酮类化合物占金银花的大部分含量，且非常高，除此以外，黄酮类物质它无毒性，可靠，无安全风险，具有抗氧化活性的重要疗效。
（4）环烯醚萜类
忍冬的花、茎、和叶等都广泛含有环烯醚萜类化合物。环烯醚萜又可称之为烯二醛，对有人体治疗的重要疗效，诸如保肝解毒、神经系统的治疗、消炎抗菌等疗效。环烯醚萜类化合物有两种基础的碳骨架，分别是裂环烯醚萜和闭环环烯醚萜两类[20]。士的宁、7士的宁、8士的宁这三种物质为闭环环烯醚萜类；裂殖子酸、獐牙菜苷、裂殖子苷、7－ 上环皂苷等[21]为裂环环烯醚萜。此外，相关研究人员还将环烯醚萜苷的含氮类产物，二聚环烯醚萜苷[22]从金银花中水提液中提炼出来，做出了杰出贡献。
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