摘 要玉竹属于百合科，药用部分是其干燥的根茎。实验以玉竹作为研究对象，提取玉竹中的总多糖和总黄酮成分。采用水提取总多糖，以超声时间、温度、功率和料液比作为考察因素；采用乙醇提取总黄酮，以超声时间、次数、料液比和乙醇的浓度作为考察因素。在单因素最优的条件下，用Box-Behnken软件对影响提取含量和浸膏得率的主要因素进行四因素三水平的实验设计，并利用Design-Expert软件对数据分析，得出最佳工艺结论。经过实验后，得出最优的水提总多糖的方案条件是超声温度为40℃，超声时间为30min，超声功率为600W，加25倍量水，多糖得率10.78%，浸膏得率55.49%。总多糖的三组验证试验中多糖得率分别为10.71%、10.63%、10.88%，浸膏得率分别为55.45%、56.12%、55.50%，验证试验结果与最佳方案结果相近，说明此工艺方案可行；醇提总黄酮的最优方案条件是超声时间为31min，超声次数为2次，加21倍量71%的乙醇，总黄酮得率25.96%，浸膏得率55.21%。总黄酮的三组验证试验中黄酮得率分别为25.89%、25.86%、26.02%，浸膏得率分别为55.24%、55.22%、55.25%，验证试验结果也与最优方案结果相近，说明该方案可行。
Key words: Phyllostachys pubescens; Ultrasonic; BoxBehnken response surface method目 录
1 引言 1
1.1 玉竹药材的研究概况 1
1.2 总黄酮的研究概述 1
1.3 总多糖的研究概述 1
1.4 研究意义 2
2 实验 3
2.1 试验仪器与试剂药品 3
2.1.1 试验仪器 3
2.1.2 试剂药品 3
2.2 实验内容 4
2.2.1 总多糖的提取工艺及含量测定 4
2.2.2 总黄酮的提取工艺及含量测定 12
3 结论与讨论 21
3.1 结论 21
3.2 讨论 21
3.2.1 超声波影响因素的选择 21
3.2.2 苯酚硫酸法的选择 21
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3.2.3 权重系数的选择 21
3.2.4 总多糖和总黄酮最大吸收波长的测定 22
参考文献 23
致 谢 25
附 录 26
1 引言
1.1 玉竹药材的研究概况
玉竹又名葳参、黄芝、地节、萎蕤等，是百合科黄精属多年生草本植物，其性微寒，味甘甜，归肺经，具有生津止渴、润肺燥痰、生肌养血、补中益气等功效。在我国分布比较广泛，可药食两用，主要化学成分是甾体皂苷、总黄酮、总多糖、挥发油、氨基酸和其他微量元素[1]。临床药理研究表明，玉竹在治疗免疫学肝损伤、降血糖、抗肿瘤、抗病毒、抗疲劳、抗氧化、延缓衰老等方面有较大疗效。其中治疗免疫学肝损伤是由于玉竹提取物可以抑制T淋巴细胞的增殖从而调节Th1和Th2的数量和比例来治疗免疫学肝损伤[2]；玉竹总皂苷可以抑制葡萄糖酶的活性降血糖；玉竹水提取物还可以抑制癌细胞增长并诱导其凋亡；玉竹醇提取物能够治疗内毒素性休克。除此之外，降低运动后血乳酸升高抗疲劳、抑制UVA所引起的成纤维细胞活性下降、增强细胞抗氧化能力等都是其有效的临床作用[3]。玉竹除了以上的药用价值以外，还被开发做保健品，如玉竹茶、玉竹果脯等，都深受广大消费者的喜爱。玉竹药用价值丰富，具有广泛的开发前景，近年来市场需求量越来越大，价格比较平稳，适用于大生产，所以对玉竹这一药材的研究的深入必不可少。
1.2 总黄酮的研究概述
总黄酮类物质是植物的次生代谢物质，以游离态和结合态形式存在，在木质部多以苷元形式存在，而在果实中多以苷形式存在[4]。总黄酮类成分有许多药用价值，如银杏叶总黄酮具有良好的镇痛、抗凝血、降压等作用，并能够有效治疗老年痴呆症；黄蜀葵花中的总黄酮具有抗脂质过氧化，减少自由基生成的功效，减少心肌损伤；甘草、苦参和沙棘以及黄芩茎叶总黄酮可有效治疗心律失常；而山楂叶中的总黄酮，具有抗血栓形成、抗心肌梗塞、强心等作用，并可调节脂质代谢[5]。
1.3 总多糖的研究概况
多糖，分为水不溶物和水溶物，其中直糖链型在水中容易溶解，支糖链型则不容易在水中溶解[6]。多糖还具有较多生理活性，如香菇多糖具有抗肿瘤活性，黄芩多糖具有增强免疫功能的作用，茯苓次聚糖具有抗肿瘤活性，玉竹总多糖具有降低血糖浓度、抗癌变、增强免疫功能、延缓衰老等作用[7]。正是由于玉竹增强免疫作用，使得玉竹有向着养生保健品方向开发的巨大潜能[8]。
1.4 研究意义
当今，科技快速发展，对于各种中药的研究不会停滞不前，人们不再停留在“良药苦口利于病”这样的想法上，而是更趋向于通过药膳来预防或治疗疾病，尤其是像玉竹这样药食两用的药材更是研究的重点。但是市场上对玉竹这一药材的关注度明显不够，无法让玉竹成功打入国内市场，所以加大对玉竹的研究势在必得。玉竹在很多常用中药配伍当中，如益胃汤、扶元逐疫汤、国公酒、养阴甘桔汤等。更是重要的出口药材之一，需求量巨大，国内对玉竹活性成分的研究虽然偶有报道，但依然缺乏完整性的研究[9]，并且玉竹原药材及饮片的质量无法控制，各地玉竹质量参差不齐，从而制约了玉竹的发展。
玉竹中的多糖和黄酮无疑是众多有效成分中最有代表性的，黄酮成分和多糖成分对人体各种疾病都有治疗帮助，从传统的治疗五脏疾病发展到现代的临床疗效，这都说明了这两者有良好的应用前景。所以对玉竹中的总黄酮和总多糖的提取工艺研究是必不可少的一部分[10]。采用超声波辅助提取主要是考虑到该方法辅助可以更有效的提取出有效成分，在加快有效成分的溶出后还能不破坏有效成分，是提取试验中常用到的方法。综合以上，采用超声波辅助提取玉竹中的总黄酮和总多糖，以期之后对玉竹的研究能提供更新的数据参考。2 实验
2.1 试验仪器与试剂药品
2.1.1 试验仪器
表2.1 试验仪器
仪器名称
型号
出厂公司
电热恒温水浴锅
HHS4型
北京科伟永兴仪器有限公司
旋转蒸发仪
RE52AA型
上海亚荣生化仪器厂
循环水式多用真空泵
SHZD(III)型
河南省予华仪器有限公司

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