hplc法测定c1给药制剂含量的方法验证【字数：8216】
目 录
1.绪论1
1.1方法验证的介绍 1
1.2高效液相色谱的原理和作用1
1.3实验目的和意义1
2.材料与方法2
2.1实验材料2
2.1.1原料2
2.1.2试剂2
2.1.3主要仪器和设备2
2.2试验方法2
2.2.1试剂和样品准备2
2.2.2分析方法4
2.2.3方法学验证4
3.结果与讨论6
3.1系统适应性 6
3.2特异性结果7
3.3系统残留8
3.4标准曲线9
3.5精密度与准确度 10
3.6标准品储备液稳定性12
3.7供试品给药制剂稳定性及均一性13
3.8配置后样品稳定性 14
4.结论15
5.展望17参考文献18
致谢20
1.绪论
1.1方法验证的介绍
方法验证从本质上来说，就是根据监测的要求，预先设定要验证的内容，然后通过设计合理的实验进行验证，以证明这个分析方法符合检测项目的目的和要求。只有通过验证的分析方法才能用来检测生产药物的质量。方法验证的内容一般有准确度、精密度、系统适用性等，具体验证项目要根据检测目的来决定。
1.2高效液相色谱的原理和作用
高效液相色谱法(HPLC)是现在应用较为广泛的分离、分析、纯化有机化合物的方法。HPLC法的原理是用高压下的液体为流动相，然后用颗粒极细的高效固定相的柱色谱进行分离。高效液相色谱对样品的适用 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: &351916072&
性很广，不因分析对象的挥发性和热稳定性而受到限制。
高效液相色谱仪的主要结构有“高压输液泵”、“色谱柱”、“进样器”、“检测器”、以及“数据获取与处理系统”等部分。其中色谱柱是分离样品中的各个物质；进样器是将待分析样品引入色谱系统；检测器是将被分析组在柱流出液中浓度的变化转化为光学或电学信号；数据获取和处理系统是把检测器检测到的信号用图和者数字显示出来。
1.3实验目的和意义
药物是用来预防、治疗及诊断各种疾病的物品。但是，在药物生产过程中，不光可以生产出有对疾病直接作用的有效成分，还有一些杂质。这些杂质有的对人体没有害处，有的却会威胁到人们的身体健康。如果在药物生产后，没有进行及时测定分析，就可能会影响药物的质量，从而对使用药的患者产生一些潜在的风险。近年来，也发生了许多药品安全事故，例如“欣弗”事件，“清开灵”事件等等。因此，在药物投入生产前以及药物在大规模批量生产后，都需要进行药物分析。
2.材料与方法
2.1实验材料
2.1.1原料
供试品：注射用C1
标准品:C1
2.1.2试剂
乙腈 Fisher Scientific
氯化钠注射液 安徽双鹤药业有限责任公司
2.1.3主要仪器和设备
HPLC SHIMADZU
色谱柱 Phenomenex
电子天平 KERN和Mettler Toledo
移液器 BRAND和Thermo
漩涡混合仪 Scientific Industries
超声波清洗机 宁波新芝生物科技股份有限公司
超纯水系统 MERCK
2.2实验方法
2.2.1试剂和样品准备
(1)流动相配制：A相（超纯水）：量取1 L超纯水，超声脱气至少15分钟待用。B相（乙腈）：量取1 L乙腈，超声脱气至少15分钟待用。
(2)标准品储备液配制：精密称取两份标准品约10 mg（± 0.1），分别加入氯化钠注射液使其全部溶解并定容至10 mL，配制成浓度约为1 mg/mL（浓度 = 质量 × 含量 /体积）的标准品储备液（Stock 1与Stock 2）。将Stock 1与Stock 2用氯化钠注射液分别稀释至浓度为100 μg/mL，重复进样5次，峰面积平均值的偏差（峰面积平均值的差值/总峰面积均值 × 100%）在0.76% 2.91%之间（表1）。偏差在5%以内，则认为储备液均配制准确，选其中任意一份作为最终的标准品储备液（Stock A）。
(3)供试品给药制剂配制：使用氯化钠注射液分别配制浓度为40 mg/mL的供试品溶液A（Formulation A）、3 mg/mL的供试品溶液B（Formulation B）和0.05 mg/mL的供试品溶液C（Formulation C），浓度 = 规格 × 瓶数 ×含量 /体积，配制方法为，取适量供试品，加入适量氯化钠注射液溶解混匀后转移到量筒中，再加入适量氯化钠注射液清洗并将清洗液转移至量筒中，于量筒中加入适量溶媒至所需体积，混匀得到供试品溶液。亦可使用溶媒稀释高浓度供试品溶液得到低浓度供试品溶液。
(4)标准曲线样品配制：用氯化钠注射液将Stock A按照下表稀释，配制相应的标准曲线溶液：
溶液名称
原溶液
氯化钠注射液
体积（μL）
终体积
（μL）
终浓度
（μg/mL）
名称
体积
（μL）
原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/zygc/83329.html
