摘 要南苜蓿是苜蓿属的一、二年生草本植物，其活性成分主要有多糖、皂苷、酚类等。南苜蓿多糖产业开发具有良好前景，因此，优化制备工艺，提高多糖提取率具有一定现实意义。结合实验室现有条件，首先采用单因素实验，探究液料比、提取时间及提取温度对南苜蓿多糖提取率的影响，然后通过响应面实验，优化计算出南苜蓿多糖提取工艺提取时间1.61h、提取温度82℃、液料比69（mL /g）。此条件下南苜蓿多糖理论提取率达到4.471%，实际提取率为4.283%，偏差值为0.188%。之后，在此基础上，进行南苜蓿多糖的体外抗氧化实验，测定其在此提取工艺之下的抗氧化活性，发现南苜蓿多糖具有良好抗氧化能力，为高效提取方法的开发提供实验数据支撑。
目录
1.前言 1
1.1国内外研究现状及分析 1
1.2南苜蓿多糖的提取方法 2
2.材料与方法 3
2.1材料与仪器 3
2.1.1材料 3
2.1.2仪器 3
2.2实验方法 3
2.2.1多糖提取 3
2.2.2葡萄糖标曲制作 4
2.2.3提取率计算 4
2.2.4南苜蓿多糖提取单因素实验 5
2.2.5南苜蓿多糖提取响应面实验 5
2.3体外抗氧化活性 6
2.3.1清除DPPH自由基能力测定 6
2.3.2清除羟基自由基能力的测定 6
2.3.3还原力的测定 7
3.结果与分析 7
3.1单因素实验结果及分析 7
3.1.1提取时间对多糖提取率影响 7
3.1.2提取温度对多糖提取率影响 8
3.1.3液料比对提取率的影响 9
3.2响应面实验结果与分析 9
3.2.1Box－Behnken 设计方案及结果 9
3.2.2模型建立和显著性检验 10
3.2.3等高线图及响应面图分析 11
3.3体外抗氧化活力评价 14
3.3.1清除DPPH自由基能力 14
3.3.2清除羟基自由基能力 14
3.3.3还原力测定 1 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: #351916072# 
5
4.结论 16
4.1单因素实验结果 16
4.2响应面实验结论 16
4.3体外抗氧化活性 17
参考文献 18
致谢 201.前言
南苜蓿具有清热凉血，利湿退黄，通淋排石，生津之功效。南苜蓿是豆科、苜蓿属的一、二年生草本植物，高可达90厘米。茎近四棱形，基部分枝，叶片卵状长圆形，先端渐尖，基部耳状，边缘具不整齐条裂，脉纹明显；叶柄细长柔软，花序头状伞形，总花梗腋生，纤细无毛，苞片甚小，尾尖；萼齿披针形，花冠黄色，旗瓣倒卵形，翼瓣长圆形，子房长圆形，种子长肾形，35月开花，56月结果。南苜蓿的根瘤菌固氮，增加后茬农作物的粮食产量；同时还提高了冬春农田的覆盖率，减少了土壤水分的蒸发，有保护生态环境作用。适于在肥沃的旱地或排水良好的地区。生长适温为1217℃，在亚热带地区生长较好；耐寒性较强，在5℃的低温下，其叶片虽会被冻死，但气温回升后又会萌芽生长；对土壤适应性较广，在pH值为5.08.6的土壤中，均能生长正常。分布于中国长江流域以南各省区，以及陕西、甘肃、贵州、云南。常栽培或呈半野生状态。欧洲南部、西南亚，以及整个旧大陆均有分布，并引种到美洲、大洋洲。这表明南苜蓿数量众多，作为原材料可以快速大量获得，保证了实验材料的充足。同时南苜蓿适应能力强，则表明南苜蓿具备一些特殊的适应能力和存活力，作为原料价格便宜，节省实验成本。
多糖是一类由不同单糖通过糖苷键链接而成的大分子聚合物，广泛存在于植物、动物、菌类和微生物中，常与蛋白结合，在生命体生长、发育过程中扮演重要角色[1]。研究表明，植物多糖有清除自由基等作用，补充多糖具有抗肿瘤、抑菌、抗病毒、抗衰老以及抗氧化功能。南苜蓿中含有丰富的多糖，同时具有较高活性，日渐受到重视。苜蓿多糖保健品、功能性食品等方面开发上具有重大研究前景，对于预防和治疗肿瘤性疾病都有巨大的潜力。
1.1国内外研究现状及分析
伴随众多类型的功能保健品的出现，天然产物活性物质和人们的联系越来越深，消耗也日渐增大，苜蓿多糖提取技术的发展和研究也变得越来越重要。国外对南苜蓿进行研究，研发制备出许多的相关南苜蓿产品，例如苜蓿营养保健品，但在中国对苜蓿的利用主要以草粉的形式做畜禽饲料，部分加工后用作饲料添加剂可是在国内对苜蓿的利用还处于最初阶段，将南苜蓿原材料经过简单的粉碎烘干制成草粉，当成喂养牲畜的饲料，部分经过简单加工制成饲料添加剂。由此可见，南苜蓿的价值在国内还没有开发利用到最大化收益。所以从现在起我们应着眼于南苜蓿的开发利用，通过对南苜蓿多糖的全面研究，探索南苜蓿多糖在抗氧化、免疫调节和抗肿瘤等方面的作用，进而研究生产、建立南苜蓿多糖一条链相关制品，充分利用南苜蓿多糖的价值[2]。
1.2南苜蓿多糖的提取方法
目前提取植物多糖的方法主要有碱提法、热水浸提法、超声波提取法、酶提法和微波辅助提取法等[34]。
微波辅助提取：植物多糖普遍存在细胞壁中，多糖提取旨在释放细胞内多糖。微波能够穿过细胞壁，作用于胞内，营造一种高温高压的环境状态，植物细胞长时间处于这种状态之下，胞内液体物质挥发迅速，压力逐渐变大，压力突破细胞承受最大值时，细胞壁和细胞膜破碎，胞内容物流出，达到提取的目的。该方法反应时间短，环保节能，溶剂消耗少，不过要防止微波时间过长，改变多糖结构，降低多糖提取率[2]。
超声波辅助提取：通过超声波产生空穴效应，热效应和机械效应三种机制，破坏细胞结构，实现提取目的。超声震动引起胞内大分子产生共振，利用不同分子之间震动频率差异，令其相互作用消耗分解。胞液内气泡超声震动逐渐扩大，产生空域，当气泡进一步扩大，胞内压力增加，气泡膨胀破碎，释放巨大能量，细胞壁被破坏，多糖被释放出来。超声波辅助提取法优点：提取时间短，提取效率高，适用范围广；其缺点是长时间超声震荡造成多糖结构断裂，活性降低。

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