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荷叶中黄酮的薄层色谱研究

2021-01-05 14:47编辑: www.jxszl.com景先生毕设
摘 要 本文以荷叶中有效成分槲皮素、芦丁为指标,建立荷叶的薄层鉴别方法。以硅胶G板和硅胶GF254板为吸附剂,于紫外灯下荧光检视或三氯化铝乙醇溶液显色。通过对点样量、展开温度、展开湿度等展开条件的考察,优选最佳的薄层色谱条件,鉴别荷叶中的黄酮类化合物。在展开温度为20℃、预饱和时间为10 min、点样量为10 µL、展开环境保持干燥的条件下,展开剂为正丁醇-醋酸-水(4:5:1)和氯仿-甲醇-甲酸(15:5:1)时,在硅胶G板和硅胶GF254板上均能分离出荷叶中的芦丁成分,且展开效果理想,斑点清晰,Rf值适中;展开剂为乙酸乙酯-甲醇-水(8:1:1)时,在硅胶G板上,荷叶中的槲皮素达到了较为理想的分离效果,且斑点清晰,Rf值适中。 目 录
1 概述
1.1 研究背景 1
1.2 荷叶基源研究 1
1.3 荷叶化学成分研究 2
1.4 荷叶药理作用及临床应用研究 3
1.4.1 药理作用 3
1.4.2 临床应用 4
1.5 荷叶黄酮的提取方法研究 5
1.6 薄层鉴别研究 6
2 实验部分
2.1 实验药材、试剂与仪器 8
2.1.1 实验药材 8
2.1.2 实验试剂 8
2.1.3 实验仪器 8
2.2 实验方法 8
2.2.1 硅胶薄层板的制备 8
2.2.2 对照品溶液的制备 9
2.2.3 样品的粉碎 9
2.2.4 供试品溶液的制备 9
2.2.5 显色检视 10
2.2.6 点样 10
2.2.7 展开 10
3 结果与讨论
3.1 提取方法考察结果 14
3.2 供试品溶液萃取结果 14
3.3 斑点检视方法考察结果 15
3.4 点样量考察结果 15
3.5 预饱和时间考察结果 16
3.6 展距考察结果 16
3.7 展开温度考察结果 17
3.8 展开湿度考察结果 17
3.9 展开剂考察结果
 

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> 3.1 提取方法考察结果 14
3.2 供试品溶液萃取结果 14
3.3 斑点检视方法考察结果 15
3.4 点样量考察结果 15
3.5 预饱和时间考察结果 16
3.6 展距考察结果 16
3.7 展开温度考察结果 17
3.8 展开湿度考察结果 17
3.9 展开剂考察结果 17
3.9.1 展开剂乙酸乙酯甲醇(9:1) 17
3.9.2 展开剂乙酸乙酯甲醇水(8:1:1) 18
3.9.3 展开剂正丁醇醋酸水(4:5:1) 19
3.9.4 展开剂氯仿甲醇甲酸(15:5:1) 21
3.10 最适薄层条件的确定 23
结论 25
参考文献 26
致谢 29
1 概述
1.1 研究背景
中药材是几千年来中医文化传承而来的治病基础物质,具有中国医学特色。随着中国文化向西方国家的渗透,目前我国的中药材已经成为一种重要出口项目,在广大的国际市场上占有一定的优势。我国中药资源丰富、蕴藏量大、品种繁多,据统计我国现存的中药材约有12000多种,由于我国地大物博,所以同名异物、同物异名的药材非常多,且疗效各有差异,极易混淆。由于中药与西药的本质区别,中药想要彻底打入西方市场还需要在中药材的有效成分上做进一步研究,建立规范化的药材质量控制标准,确保我国中药材的质量,在国际市场竞争中占有绝对优势。在一系列药材质量控制研究方法中,薄层色谱的应用最为广泛。因其简便、专属性强、灵敏度高而且具有分离与鉴定的双重作用,非常适用于成分复杂的中药材的鉴别,达到建立药材质量控制标准的目的。
荷叶为睡莲科植物莲的干燥叶,呈半圆形或折扇形,其展开后呈类圆形,全缘或稍呈波状。荷叶在食用以及药用方面均有广泛的应用,其性味苦涩而平,归肝、脾、胃经,具有解暑清热、升发清阳、止血凉血之功效。经研究发现,荷叶中含有大量的黄酮类化合物。荷叶中的黄酮类化合物是一类具有较高开发价值的物质,它既可作为心血管疾病的原料药,还可将其广泛用于保健食品、功能食品、饮料、食品防腐保鲜剂及化妆品中。因此,荷叶的开发与利用,对于防治高血脂症、肥胖等疾病具有重要的意义。本论文将采用薄层色谱法对荷叶中的黄酮类化合物进行定性研究,以槲皮素和芦丁作为指标性成分,鉴别荷叶中的黄酮类化合物,为有效评价荷叶质量及开发荷叶资源提供依据。
1.2 荷叶基源研究
莲(Nelumbo nucifera Gaertn),莲科属多年生草本挺水植物,一般称为荷花,古时称为芙蕖、芙蓉、菡萏等。莲属于喜温暖喜水植物,喜欢生长在肥沃、有机质多的微酸性的粘土中,一般长到150 cm高,横向扩展到3 m,花朵最大直径可达到20 cm。荷叶一般在6~9月花朵未开放时采收,除去叶柄,晒至七、八成干时,对折成半圆形,晒干,夏季亦可用新鲜荷叶或初生嫩叶(荷钱)入药。荷叶一般分布在中亚、西亚、北美、中国、日本、印度等亚热带和温带地区,中国早在三千多年前便有栽培植物莲,现今在浙江、辽宁等地均有发现过碳化的古莲子,可见其历史之悠久。在亚洲一些偏僻的地方至今还存在野莲,但大多数的莲还是由人工种植,作为风景点缀和食用。我国的荷叶资源十分丰富,其主要分布在黄河、珠江和长江三大流域。
本品呈半圆形或折扇形,展开后呈类圆形,直径20~50 cm,全缘或稍呈波状,以叶大、整洁、色绿者为佳。荷叶上表面黄绿色或深绿色,摸之粗糙,有毛茸感。于放大镜下观察荷叶,可发现叶面布满短小钝刺,在刺与刺之间有一层稀薄的蜡质白粉。叶下表面淡灰棕色,较光滑,有粗脉21~22条,由中心向四周射出;中心有突起的叶柄残基。质脆,易破碎,稍有清香气,味微苦[1]。
本品粉末为灰绿色,上表皮细胞多角形,外壁乳头状或短绒毛状突起;气孔不定式,富卫细胞5~8个。下表皮细胞垂周壁略波状弯曲,有时可见连珠状增厚。草酸钙簇晶多见[1],直径约为40 µm。导管旁常有分泌细胞,内含棕黄色物质。
1.3 荷叶化学成分研究
现代研究表明,荷叶内除了含有碳水化合物、蛋白质、脂类、单宁等常规化学成分之外,还富含大量具有明显的生物活性和生理功能的生物碱和黄酮类化合物[2]。荷叶中含有多种生物碱:荷叶碱(nuciferine)、去氢荷叶碱(dehydeonuci
ferine)、N去甲荷叶碱(Nnornuciferine)、O去甲荷叶碱(Onornuciferin)、牛心果碱(anonaine)、斑点亚洲罂粟碱(罗默碱,roemerine )、亚美尼亚罂粟碱(arme
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