摘要：甜叶菊作为一种新型甜味剂作物，其叶片所含甜菊糖苷正被越来越广泛地应用。为提高甜叶菊种质的甜菊糖苷含量评价效率，探讨是否可以通过对甜叶菊生长早期叶片中的甜菊糖苷成分的检测来实现对甜叶菊种质的评估，以加快育种进程。本研究以不同的甜叶菊种质为材料，分别在幼苗期和生长后期利用高效液相色谱法检测各种质植株叶片中甜菊糖苷含量，再利用SPSS软件对幼苗期和生长后期叶片中甜菊糖苷含量相关性进行分析，结果表明，在参试的64份甜叶菊种质中，有55份甜叶菊种质的幼苗期和生长后期叶片中甜菊糖苷组分及含量间相关性良好，占参试种质数的85.9%。为此，我们认为，可以根据甜叶菊幼苗期叶片甜菊糖苷含量来初步判断生长后期叶片中甜菊糖苷含量。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 试验材料 2
1.1.1 试验地概况2
1.1.2 材料2
1.2 试验仪器 2
1.3 试验方法2
1.3.1 样品处理2
1.3.2 高效液相色谱分析2
1.3.3 数据统计分析方法2
2 结果与分析3
2.1 甜叶菊幼苗期与生长后期叶片甜菊糖苷含量相关性检测结果3
2.1.1 不相关甜叶菊种质3
2.1.2 低度相关甜叶菊种质4
2.1.3 中度相关甜叶菊种质5
2.1.4 高度相关甜叶菊种质6
2.2 分析7
3 讨论7
致谢8
参考文献9
幼苗期和生长后期甜叶菊叶片甜菊糖苷含量相关性分析
引言
甜叶菊（Stevia rebaudiana Bertoni)属菊科，斯台维亚属多年生草本植物，原产地位于南美洲巴拉圭，最初在1969年被日本学者发现，1976年我国将其引进并栽培获得成功[1]。甜叶菊中所含甜菊糖苷经许多国家进行过多次安全性评估，结果显示甜菊糖苷对人体没有毒副作用[2]，可以被广泛应用。它由8种成分组成，尤其以Rebaudioside A(简称RA)使用
 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q:  3_5_1_9_1_6_0_7_2 
最多，因为经实验证明，RA甜度为蔗糖的350450倍，热量仅为蔗糖的1/300,且味质好，口感接近于蔗糖，具有无毒、高甜度、低热量等特性，长期食用不会使人发胖，特别适宜肥胖病、糖尿病、高血压等患者使用[3]，可以代替蔗糖符合现代人对健康理念的要求，而且物理、化学性质稳定、无发酵性，具有保质期长的特点[4]。甜叶菊还具有一定的药理作用，有控制血糖、降低血压、促进新陈代谢的作用，亦有治疗糖尿病、肥胖症、调节胃酸、恢复神经疲劳之功效[5]。甜叶菊干叶中除含有甜菊糖苷，还含有大量蛋白质、脂肪、纤维素、灰分和无氮浸出物等非糖成分，因此它可以进行多种产品综合开发。甜菊叶残渣属于工业废料，却是很好的有机肥料，有机质含量极高，含Ca2+和Fe2+，可改良培肥土壤，促进蔬菜和菌类的生长发育[68]。因此甜叶菊未来的发展空间极为广阔，发展前景良好。目前进行甜叶菊选育研究的较少，甜叶菊为自交不亲和的异花授粉植物,遗传性状不稳定，给选种工作带来一定困难。为了克服群体遗传不稳定性，现今多采用组织培养和无性繁殖法来稳定后代[910]，常在生长后期进行甜叶菊种质的甜菊糖苷含量评价，效率低下，为提高评价效率，本研究对幼苗期和生长后期甜叶菊叶片中的甜菊糖苷组分含量间相关性进行了分析，探讨是否可以通过对甜叶菊生长早期叶片中的甜菊糖苷成分的检测来实现对甜叶菊种质的评估，以加快育种进程。
1 材料与方法
1．1 试验材料
1．1．1 试验地概况 试验地位于江苏省大学江浦实验农场园艺站，北纬32°01′，东经118°37′，江苏省西部、长江下游中部地区，属于亚热带季风气候，雨量充沛，年降水量1200mm，年平均气温15.4℃，年日照时数15001800h，土壤肥力中等。
1．2 试验仪器
电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）、分析天平(瑞士Precisa 仪器有限公司产品)、KQ250B型超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司产品)、5810R型台式高速冷冻离心机（Eppendorf中国有限公司）、LC 10A高效液相色谱仪（日本岛津公司产品）、SPD 10A紫外检测器（日本岛津公司产品）。
1. 3 试验方法
1．3．1 样品处理 目前甜叶菊叶片的应用最广泛，且有效成分主要存在于叶片中，因此本试验采用甜叶菊叶片进行。将所采摘甜叶菊叶片分别装到信封中，并放入80℃烘箱中烘干过夜，烘干后将叶片放入研钵中磨成粉末（注意：若有叶脉，尽量将其研磨粉碎），分别称取50.0mg装入2.0ml塑料离心管中（注意：在管盖和管壁写上各植株编号），并加入1.5ml 50℃的乙醇，在振荡器上以40rpm震荡过夜，使叶片中所含成分充分溶解到乙醇中，然后放入超声仪中超声40min，取出后在离心机上以10000rpm离心15min，最后使用微孔滤膜（0.22μm油性过滤头）过滤保留上清液装入2.0ml的新离心管中放入4℃冰箱中保存以备进行下一步实验[11]。
1．3．2 高效液相色谱分析 使用高效液相仪检测成分，色谱条件为C 18(250.0mm×4.6mm，5μm)色谱柱；流动相：乙腈－水(30：70，体积比)，进行梯度洗脱，流速0.8 mL/min；柱温30℃；紫外检测器波长为210nm，进样量20μl[12]。
2 结果与分析
2．1 甜叶菊幼苗期与生长后期叶片甜菊糖苷含量相关性检测结果
经统计分析软件SPSS分析过后不具有相关性的植株共有9株，编号分别为：334、433、435、488、619、636、719、731、736；具有相关性的植株共有55株，其中具有低度相关性的植株共有12株，编号分别为：322、339、352、417、465、504、514、522、584、653、657、709；具有中度相关性的植株共有37株，编号分别为：323、328、341、351、387、392、406、409、415、416、432、442、489、507、560、563、583、597、618、623、632、649、661、669、685、686、689、691、703、705、706、707、712、737、743、746、752；具有高度相关性的植株共有6株，编号分别为：511、670、683、750、B4、B9。由于数据过多，下面将分别举两个例子进行说明。
2．1．1 不相关甜叶菊种质


图1 334号种质对照指纹图谱
注：横坐标为时间（min）；纵坐标为电压（mv）下同。
表1 334号种质数据相关性分析

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/zyx/46290.html