回流提取法提取石榴皮中总黄酮的工艺优化研究
目 录
1 前言 1
1.1 石榴皮的简介 1
1.2 石榴皮的药理作用 1
1.2.1 抗菌抗病毒作用 1
1.2.2 抗肿瘤作用 2
1.2.3 对消化系统作用 2
1.2.4 对心血管系统作用 2
1.2.5 对免疫系统作用 2
1.3 化学成分研究 3
1.3.1 黄酮类 3
1.3.2 氨基酸类 3
1.4 临床应用 3
1.4.1溃疡性结肠炎 3
1.4.2 新生儿尿布皮炎 3
1.4.3 鸡眼 4
1.5 黄酮类化合物的提取方法 4
1.6 石榴皮的研究目与意义 4
2 实验部分 7
2.1 实验材料与仪器 7
2.1.1 主要材料与试剂 7
2.1.2 仪器与设备 7
2.2 实验方法 7
2.2.1 总黄酮的测定方法 7
2.2.2 芦丁标准曲线的绘制 8
2.2.3 方法学验证 8
2.2.4 正交实验 9
2.3 实验结果 10
2.3.1 芦丁标准曲线的绘制 10
2.3.2 精密度实验结果 10
2.3.3 正交实验结果 12
结 论 15
参考文献 17
致 谢 19
1 前言
1.1 石榴皮的简介
石榴皮，可作为一种药用成分进行入药， *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: &351916072&
是石榴科石榴属石榴（Punica granatum L.)的干燥果皮[1]。石榴树原先生长于亚洲中部地区，丝绸之路时期，张骞出使游历之时将石榴带入我国，一般来说，石榴树生长于水热均衡的亚热带、温带地域，在南北地区分布较为广泛 [2]。我国五个最有影响的石榴产区有：陕西的临潼、山东的枣庄、安徽的怀远、四川的会理和云南的蒙自地区是我国石榴的优秀产区，生产的石榴个大味美，特别是蒙自地区，石榴的种植面积已经位居全国第一，仅仅是种植面积就以突破650000亩，产量高达6万余吨，全国地区的石榴总产量仅为180000余吨，占比三分之一[3]。石榴不仅是一种水果，更是一种药材，营养全面，果肉可以作为日常水果直接进行食用，果皮、根部、花等都可以直接或加工处理后进行药用。古文《罗氏会约医境》中曾有描述：“石榴的果皮，性温，味涩，具有断下，止痢，下血，脱肛等功效[4]。”
1.2 石榴皮的药理作用
随着医疗科技的发展，发现石榴皮及其提取物具有抗菌抗病毒、抗肿瘤作用，对消化系统，对心血管系统，对免疫系统都有较好的作用[5]。并且其抗氧化作用对胃有一定的抗癌保护[6]。石榴皮的药理作用集中表现在以下几个方面。
1.2.1 抗菌抗病毒作用
随着药理实验的不断发展，越来越多的试验证明，石榴皮中含有多项活性成分，鞣质在抗菌和抗病毒领域的应用有一定突破，黄酮类成分也是抗菌制剂的组成成员 [7]。研究者杨林[8]通过实验得到，石榴皮中的鞣质和黄酮成分可以对多种细菌（如大肠杆菌、沙门氏菌等）起到抑菌作用，尤其是鞣质类物质，其抑菌作用特别广泛，同时具备强大的抗耐药菌能力，黄酮类物质在广谱抗菌能力上稍逊于鞣质，对绿脓杆菌、白色念珠菌两种菌株的抑制能力效果微小。而且，不同溶剂的石榴皮提取物均可呈现出一定能力的抑菌效果 [9]；以甲醇作为提取溶剂，正丁醇作为萃取溶剂的石榴皮提取物，在玉米小斑病菌、棉花立枯菌等真菌抑菌效果上均取得了一定成效 [10]。研究者张杰[11]等人在对生殖器疱疹病毒进行试验时，发现石榴皮中的鞣质成分可对其产生一定的灭活效果，主要作用途径与蛋白质的性质有关。
1.2.2 抗肿瘤作用
石榴皮中的有效成分除鞣质和黄酮类化合物外，还有一类重要的物质便是多酚类化合物。通过药理实验探索表明，没食子酸、石榴皮亭B等多酚类物质均在抗肿瘤研究领域应用广泛 [12]。
1.2.3 对消化系统作用
胡伟[13]等人通过实验得知，石榴皮的活性成分对幽门螺杆菌的MIC 90为131.1、115.9 mg/ml，呈现明显的抑菌作用，而且在甲硝唑耐药株和敏感株培养上都具备某种程度的抗菌效果。连军[14]等学者对患有溃疡性结肠炎的老鼠喂食石榴皮的水提物质，发现老鼠的病情逐渐得到好转，结肠的溃疡面不断愈合，水肿现象得到有效治疗，组织坏死现象也明显得到缓解。李春燕[15]等研究学者在观察实验动物的十二指肠的离体收缩频率实验中，发现石榴皮的水提成分很有可能作用于乙酰胆碱代谢途径，从而降低十二指肠的收缩频率。
1.2.4 对心血管系统作用
多酚类物质多数是心血管系统的保护屏障，石榴皮中的多酚化合物也不例外，发现其在实验动物的心肌收缩实验和心率实验上均能起到减缓作用 [16]；对患有高脂血的动物模型也可帮助其降低血脂 [17]；有学者发现，石榴皮的有效成分在人体中可对内皮细胞起到一定的保护作用，具体可表现在效降低细胞膜的微黏度，提高脐静脉内皮细胞的生长存活能力，并随着提取物剂量的加大，细胞内部的抗氧化能力也能得到提升[18]；还有学者通过蟾蜍的药理实验发现，石榴皮的水提成分还能够对心脏的去极化反应进行调节，保护心脏活力 [19]。
1.2.5 对免疫系统作用
免疫系统是生命得以健康延续的首要组成部分，石榴皮的活性成分可以提高实验动物的免疫能力，抗体的OD值及HC50等指标可以得到调节[20]。
1.3 化学成分研究
石榴皮中的活性成分较为丰富，常见的有黄酮类物质、氨基酸类、生物碱及鞣质、苷类等。并含有多种微量元素（Na、k、Ca、Mg、S、P、Fe、Mn、Sr、Ba、Zn、Cu、Al）等[21]。
1.3.1 黄酮类
黄酮类成分是较为常见并应用的。石榴皮中含有大量的黄酮与鞣质类物质，其很多化合物都归属于多酚类物质[22]。
1.3.2 氨基酸类
石榴皮中的氨基酸成分种类也比较繁多：脯氨酸、组氨酸、丝氨酸、天门冬氨酸等[23]。
1.4 临床应用
1.4.1溃疡性结肠炎
梁贯洲 [24] 等学者将干石榴皮、白头翁和黄柏组成药对，用量分别为30g、20g、30g，经过熬煮制成石榴皮汤剂，同时辅以甲氧苄胺嘧啶口服制剂，共同用来治疗溃疡性结肠炎，其中通过112例患者（轻、中、重患者的比例为6:5:3）的治疗发现，轻、中度患者在每日3次服用30ml石榴皮汤，日服用2次200mg甲氧苄胺嘧啶后，多数情况有所好转；重度患者根据症状的不同显现灵活进行临床诊治，可以达到一定的治愈效果，综合来看，最终有72位病人病情得到治愈，32位病人的情况得到好转与缓解，只有8位患者服用药品后没有效果，总体的治疗有效率为92.86％。
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