为研究pH对金线莲生长及次生代谢的影响，以福建金线莲为试验材料，在不同pH的营养液中无土栽培，比较在不同pH下，金线莲的生长生理指标及主要次生代谢产物的含量。结果表明，过酸或过碱的环境可显著提高金线莲的丙二醛含量，同时也会显著增强POD、CAT、SOD等抗氧化酶的活性，过酸性的环境会导致金线莲总黄酮和总多糖的含量显著较低。偏酸性的环境下（pH=4-6），金线莲受到的胁迫较小，有效成分含量显著增多。综上，偏酸性的环境适宜金线莲的生长，在其生产时，应注意调节适宜的pH环境，有利于提高金线莲的品质。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
1 材料与方法 2
1．1 试验材料 2
1．2 试验设计 2
1．3 测定项目及方法 2
1．3．1 金线莲生长指标的测定 2
1．3．2 金线莲生理指标的测定 2
1．3．3 金线莲次生代谢产物含量测定 2
1．3．4 数据分析 2
2 结果与分析 2
2．1 pH对金线莲生长情况的影响 2
2．2 pH对金线莲生理生化活性的影响 3
2．2．1对保护酶活性的影响 3
2．2．2对丙二醛含量的影响 4
2．3 pH对金线莲次生代谢产物的影响 5
3 讨论 5
3．1 pH对金线莲生长情况的影响 5
3．2 pH对金线莲抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响 5
3．3 pH对金线莲次生代谢产物含量的影响 6
4 结论 6
致谢 7
参考文献 7
pH对金线莲生长及次生代谢的影响
引言
金线莲（Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl）为兰科（Orchidaceae）开唇兰属的多年生草本植物，别名金线兰、金线草、树草莲等，是一种珍贵的中药材。金线莲全草入药，味甘、性平，具有清热解毒、除湿凉血的功效，常被美称为“药王”“金草”，在治疗高血压、糖尿病、急慢性肝炎、 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: #351916072# 
肺炎等病症方面的作用日渐受到广泛重视[13]。迄今为止，中外学者已经从金线莲中提取分离了多糖、黄酮类化合物、氨基酸、生物碱等[4]化学成分。金线莲对生态环境要求严格，实验和观察表明，金线莲对土层的土壤性状有较高要求，宜生长于有机质含量高、疏松、通气、透水、含水量25%40%、中性或微酸性(pH4.56.5)的森林腐殖土或经风化的黄壤土中，野生分布于我国福建省、台湾省等地。在实际生产中，各地普遍采用组培快繁，人工基质栽培的模式。目前关于金线莲组培快繁的报道较为常见，但就基质pH对金线莲组培苗生长和次生代谢的影响方面研究较少。本实验采用水培法，研究pH对金线莲生长发育及次生代谢的影响，以期为其在实际生产中的应用提供技术指导。
1 材料与方法
1．1 试验材料
供试材料引自福建南靖，为已发根的组培苗，经大学王康才教授鉴定为兰科金线莲（Anoectochilus roxburghii）。
1．2 试验设计
本试验在大学温室内进行，采用1/2 MS配方配制营养液，置于无土栽培容器中，并用NaOH和HCl将营养液的pH分别调节为3.0、4.0、5.0、6.0、7.0。将组培的金线莲幼苗用清水洗净，每个容器里移栽40株，高度以保证幼苗根可全部浸在营养液中又不触碰到容器底部为宜，用氧气泵补充氧气。在温度25±2 ℃，光照强度10001500 xl，每天光照12 h条件下培养21 d。生理指标于处理7 d、14 d、21 d时测定，生长指标和次生代谢产物含量于处理21 d后统一测定。
1．3 测定项目及方法
1．3．1 金线莲生长指标的测定 于培养21 d采收后，每个处理随机选取6株，清洗干净，测量整株株高以及主根的长度。
1．3．2 金线莲生理指标的测定 超氧物歧化酶（SOD）活性采用氮蓝四唑法[5]；丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸法[5]；过氧化物酶（POD）活性采用愈创木酚法[5]；过氧化氢酶（CAT）活性采用高锰酸钾滴定法[5]。
1．3．3 金线莲次生代谢产物含量测定
总黄酮含量测定采用紫外分光光度法[6]。精密称取芦丁对照品2.5 mg置25 mL容量瓶，加95%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀得对照溶液。精密量取芦丁对照品溶液0 mL、1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL置于10 mL容量瓶中，用NaNO2Al(NO3)3NaOH法显色，显色后于510 nm波长下比色并记录吸光度，以对照品含量（mg）为横坐标，吸光度为纵坐标，计算测定总黄酮含量所用的线性关系做标准曲线。取金线莲样品0.5 g，加入5 ml 95%乙醇，用保鲜膜封口，超声处理60 min，用漏斗过滤后再用95%乙醇冲洗，重复3次，定容至5 mL作供试液，测量其分光光度值。
多糖含量的测定采用苯酚－硫酸法[7]。精密称取105 ℃干燥至恒重的葡萄糖标准品1 g，溶解定容于100 mL容量瓶中，摇匀得对照溶液。精密量取对照品溶液0.0 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0mL，置于10 mL试管中，加入5%苯酚1 mL，浓H2SO4 5 mL摇匀，沸水浴中加热20 min，冷却5 min，以1 mL蒸馏水作空白对照，于490 nm波长下比色，做标准曲线。取金线莲干粉0.5 g，置于25 mL容量瓶中，加水至刻度，80 ℃水浴加热90 min，取出冷却至室温，提取液摇匀后过滤，滤液中加入50 mL无水乙醇，离心取上清，沉淀用90%乙醇洗涤2次，弃上清，沉淀加水溶解，定容25 mL，得到样品溶液，测量其分光光度值。

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