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柴胡浸膏制备四逆散可行性分析【字数:5072】

2024-02-25 17:48编辑: www.jxszl.com景先生毕设
目的依照古方四逆散配伍比例, 探究不同煎煮时间、不同浓度柴胡浸膏经稀释后按照不同拆方配伍其芍药苷煎出量变化,探讨柴胡浸膏对白芍中芍药苷煎出率的影响,指明柴胡浸膏或其颗粒剂对柴胡原药材的替代性,并对四逆散的组方规律进行初步研究。方法利用传统方法制备柴胡浸膏并稀释,参照四逆散古方中用药配伍比例,煎煮提取芍药苷,利用高效液相色谱测定芍药苷的含量。结果不同提取时间柴胡浸膏均对白芍中芍药苷溶出有促进作用,但不同提取时间芍药苷煎出量有明显影响,20、40、60min柴胡浸膏-白芍-枳实处理时,芍药苷煎出率均较高,相对于白芍单煎分别提高了128.34%、108.86%、103.7%。柴胡浸膏可部分替代柴胡原药材进行四逆散制备,但仍需对后续制备工艺环节加以优化。结论枳实、甘草均能促进芍药苷的溶出,另外,20min柴胡浸膏对芍药苷溶出促进作用最明显。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
key words 3
引言 3
1 实验仪器与试剂 3
1.1 仪器 4
1.2 试剂 4
1.3材料 4
2 实验方法和结果 4
2.1 实验方法 4
2.1.1 色谱条件 4
2.1.2 对照品溶液制备 4
2.1.3 样品溶液的制备 4
2.1.4 线性关系 4
2.1.5 稳定性试验 5
2.1.6 重复性试验 5
2.1.7 加样回收率试验 5
2.2 结果与分析 5
2.2.1 不同实验组煎煮不同时间芍药苷煎出量的比较 5
2.2.2 不同配伍比例对促进芍药苷溶出程度的比较 6
3 讨论 7
4 致谢 9
5参考文献 9
柴胡浸膏制备四逆散可行性研究
学 生 玄铁
引言
白芍为毛茛科 (Ranunculaceae) 植物芍药 (Paeonia lactiflora Pall)的干燥根,白芍性味苦、酸, 微寒。归肝、脾经, 功效为养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛、平抑 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: #351916072
肝阳[1]
四逆散出自《伤寒论辨少阳病脉证病治》,由柴胡、枳实、白芍、炙甘草组成,具有透邪解郁、疏肝理脾的功效。本方仅四味药,但选药精炼,配伍严谨,被后世赞誉为疏肝之祖方,多年来备受医家青睐;近现代以来,随着对四逆散研究的深入,四逆散已广泛运用于内、外、妇、儿等各科领域。本课题通过单独提取柴胡浸膏,加以稀释,依照提取时间不同,划分不同提取浓度,分别制备并与不同配伍组煎剂,并检测芍药苷的含量,探究柴胡浸膏制备四逆散的可行性。
1 实验仪器与试剂
1.1 仪器
LC20AT高效液相色谱系统仪(日本岛津科技有限公司,手动进样阀门,SPD20A紫外可见光检测器),JA2003B电子天平(上海越平科学仪器有限公司),DHG9140A型电热恒温鼓风干燥箱(上海三发科学仪器有限公司),电炉(1500W,常州市江南实验仪器厂),KH500型超声清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司),SHⅢ循环水式真空泵(南京科尔仪器设备有公司)
1.2 试剂
甲醇(色谱纯)、乙醇、乙腈(色谱纯)、磷酸(色谱纯)、纯净水、芍药苷标准品(中国药品生物制品检定所)。
1.3材料
2 实验方法和结果
2.1 实验方法
2.1.1 色谱条件
流动相:乙腈:0.1%磷酸溶液(14:86);流速:1mL min1;检测波长:230 nm;柱温:室温;进样量:15uL。
2.1.2 对照品溶液制备
精密称定芍药苷标准品12.00mg,置于50 mL的容量瓶中,加甲醇(色谱纯)定容为0.24mgmL1的溶液,摇匀,静置备用。
2.1.3 样品溶液的制备
称取柴胡药材5g,加10倍质量水,浸泡40分钟,武火煮沸后改用文火,煎煮20、40、60min,浓缩制成浸膏备用。
以四逆散古方中配伍比例为基础,将不同浓度柴胡浸膏(均稀释至50g/组)分别与枳壳、芍药、炙甘草以不同比例配伍,分别为白芍枳实甘草、白芍枳壳、白芍甘草、白芍(5 g)单煎按照芍药枳壳甘草(1:1:1),芍药枳壳(1:1),芍药甘草(1:1),芍药(1)的比例进行配伍。并加10倍质量水,浸泡40分钟,武火煮沸后改用文火,煎煮1 h,每隔20 min提取煎煮液并测定芍药苷含量。
2.1.4 线性关系
取标准品溶液,过微孔滤膜,分别进样1L、3 uL、10uL、15 uL、20 uL,依照色谱图、峰面积进行线性回归分析,经计算表2数据的回归方程为:y = 102619x+127283,R² = 0.9998。
表2 标准品芍药苷含量及峰面积
Table 2 Standard Paeoniflorin Content and Peak Area
进样量﹙µl﹚
芍药苷含量﹙µg﹚
峰面积
1
3
10
15
20
0.24
0.72
2.4
3.6
4.8
216983
654586
1153198
1673607
2171632
//
A芍药苷标准品色谱图 B芍药苷供试品色谱图
图1. 芍药苷测定的HPLC图
Figure 1. HPLC plot of paeoniflorin assay
2.1.5 稳定性试验
精密量取白芍单煎的供试品溶液15 uL,在2.1.1的色谱条件下,测定芍药苷含量,分别测定5次,峰面积的平均值为650358,RSD=3.89%。
2.1.6 重复性试验
精密称量同一批次白芍药材5 g,共5份,按照2.1.3中样品溶液制备方法进行制备,在2.1.1的色谱条件下测定芍药苷含量,得白芍中芍药苷平均含量为5.31mg g1。
2.1.7 加样回收率试验
精密量取白芍单煎的供试品溶液1 mL,加入芍药苷标准品溶液﹙0.24 mgmL﹣1﹚1 mL,共五份,置于10m容量瓶中,用50%乙醇定容至刻度,按照色谱条件, 选定进样量为15ul,得出峰面积并计算平均回收率。回收率均在95%103%之间,平均回收率为99.2%,RSD数值为2.6%。
2.2 结果与分析

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